以抗菌肽为生物识别元件快速检测大肠杆菌O157:H7的比色传感方法

发布时间：2024-03-28 01:53

　　食源性致病菌严重威胁人类身体健康,长期以来备受关注。检测食源性致病菌的方法包括培养计数法、免疫学方法、分子生物学方法和生物传感方法等。抗菌肽(antimicrobial peptide,AMP)是一种新型生物识别元件,已应用于检测食源性致病菌的生物传感器中。本文利用AMP在细菌表面丰富识别位点的优势,实现AMP的识别和信号放大的双功能,构建一系列快速、灵敏检测大肠杆菌0157:H7的比色传感方法。主要内容如下:1、免疫磁分离技术在分离大肠杆菌O157:H7中的应用免疫磁分离技术能从食品样本中特异性的分离富集食源性致病菌。本章对大肠杆菌0157:H7的捕获率高达90%。同时,本文利用磁分离-洗脱法,将磁珠表面捕获到的细菌洗脱,回收率为85%。该方法有望降低磁珠的非特异性吸附,降低背景信号,为后续检测方法开发奠定良好的基础。2、基于生物素-抗菌肽和生物素-辣根过氧化物酶竞争作用检测大肠杆菌0157:H7本章通过偶联生物素的AMP(bio-AMP)和偶联生物素的辣根过氧化物酶(bio-HRP)在链霉亲和素磁珠(MNB-SA)表面的竞争反应实现大肠杆菌0157:H7的比色法检测。实验过程中,b...

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【部分图文】：

图１．１?２００６－２０１５十年中国食源性疾病暴发情况Ｗ??Ｆｉｇ．?１．１?Ｆｏｏｄｂｏｍｅ?ｐｏｉｓｉｏｎｉｎｇ?ｉｎ?Ｃｈｉｎａ?ｆｒｏｍ?２００６－２０１５．??

展中国家和地区为甚，非洲每年有９１００万人感染食源性疾病，其中１３．７万人死??亡Ｗ。在中国，食源性疾病的暴发事件也极为普遍，平均每年感染数１０万例，涉??及人数１０００多万，其中，由食源性致病菌引起的占一半以上（图１．１）?［３］。因为??监测系统尚在完善中，所以实际生活中发生....

图１．２扫描电镜下大肠杆菌照片??Ｆｉｇ．?１．２?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?Ｅ．?ｃｏｌｉ?ｂａｃｔｅｒｉａ．??

大肠杆菌〇１５７：Ｈ７造成多起食源性疾病的暴发，被列为最重要的食源性??致病菌之一。大肠杆菌０１５７：Ｈ７的形态及各方面理化性质简单介绍如下：??形态：杆状，尺寸在１－３?ｐｍ，无芽孢，周身鞭毛（如图１．２）。??生化特性：除２４小时之内不发酵山梨醇之外，其他常见的生化特性均与其....

图１．４常见ＥＬＩＳＡ原理图??

－细菌－抗体”三明治结构检测大肠杆菌０１５７：Ｈ７，经过一夜的增菌，能在碎牛肉和??乳制品中检测到０．２－０．９ｃｆｌｉ／ｇ。食品工业中常用的质量控制方法是酶联免疫吸附??法，基本原理如图１．４所示，相比于传统的培养和菌落计数法，ＥＬＩＳＡ具有特异??性好，快速方便，省时省力等优....

图１．６比色法检测食源性致病菌的原理图引用获爱思唯尔版权许可??

浙江大学博士学位论文?第一章绪论??实现对细菌的比色检测（原理如图１．６）。??Ｎｏｆｏｏｄｂｏｍｅ?Ｘ?ＮａＣ＊?＾??＾?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｇｅｎｏｍｅ?＇?＾?＼?＿?＊ＴＴ＾ｐｐ?＇??／１Ｎ?八?＃?康??．赛：??］＞ｔｉｍ??．．?－＾＾７?Ｆｏｏｄｂｏｒｎｃ?Ｂａ....

本文编号：3940824