基于酶和DNAzyme辅助信号放大荧光传感检测疾病标志物

发布时间：2024-05-10 22:43

　　疾病的治愈率随医学科技的发展逐渐提升,但总的死亡人数仍在上涨。有专家表明,慢性疾病的发病率在未来十年内都会有显著地增长。由于早期疾病诊断与多数患者的性命密切相关,因此越来越多的科学家们对这方面予以足够的重视。甚至提出了许多适用于该领域的检测方法,为前线医护人员在确定和排除疑似患者方面,提供了强有力的辅助。其中,核酸检测作为一种精准有效的检测手段,在食品安全、环境监测、疾病诊断等领域中得到了广泛的应用。众多研究表明,基于分子水平的核酸检测在分析应用中有着快速、简单、灵敏等优势,应用前景极为广阔。其中,荧光DNA生物传感器作为一种非常有效的核酸检测手段,广泛适用于多种疾病标志物的分析研究中。并且该传感平台在分析检测中的优势显著,如省时、便捷、灵敏、成本低等。然而,由于待测样品中的目标物浓度在实际分析研究检测中常常处于较低水平,因此通常需要借助一些信号放大策略的辅助来完成这样低浓度下的样品检测。本文以三磷酸腺苷(ATP)、凝血酶以及microRNA-1246为疾病标志物模型,在酶或DNAzyme的辅助下,巧妙地结合环介导的等温扩增(LAMP)、滚环扩增(RCA)和toehold链置换(TSD...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 荧光DNA生物传感器
        1.1.1 研究背景
        1.1.2 信号导入
        1.1.3 应用分类
    1.2 荧光传感器的信号放大
        1.2.1 酶辅助放大技术
        1.2.2 纳米材料辅助放大技术
        1.2.3 DNAzyme辅助信号放大技术
        1.2.4 DNA自组装放大技术
        1.2.5 Toehold介导的信号放大技术
    1.3 本文研究思路
第二章 聚合切口酶触发的LAMP循环放大策略用于人血清中的微量蛋白质检测
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 材料和试剂
        2.2.2 凝血酶的放大检测过程
        2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验(PAGE)
        2.2.4 荧光测量
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 实验原理
        2.3.2 可行性研究
        2.3.3 实验条件的优化
        2.3.4 线性与选择性研究
    2.4 结论
第三章 高效的指数滚环扩增分子网用于超灵敏且无标记检测Micro RNA
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 化学药品和试剂
        3.2.2 环形探针(CP)的制备
        3.2.3 基于PNR和 RCA的整合扩增检测mi RNA-1246
        3.2.4 非变性PAGE试验
        3.2.5 人血清中miRNA的测定
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 实验原理
        3.3.2 可行性研究
        3.3.3 优化实验条件
        3.3.4 线性和选择性分析
    3.4 结论
第四章 目标物催化组装形成的金属离子DNAzyme用于放大检测ATP
    4.1 前言
    4.2 实验部分
        4.2.1 化学品和试剂
        4.2.2 ATP荧光扩增检测实验过程
        4.2.3 非变性PAGE试验
        4.2.4 荧光强度测量
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 提出的ATP荧光传感策略的原理
        4.3.2 ATP检测策略的可行性研究
        4.3.3 优化实验条件
        4.3.4 检测策略的性能分析
    4.4 结论
参考文献
研究生期间发表的论文
致谢



本文编号：3969124