阵列纸芯片比色法检测碱性磷酸酶

发布时间：2017-08-17 11:34

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【摘要】：采用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)显色体系,构建了阵列纸芯片比色检测碱性磷酸酶(ALP)的方法。首先,借助烘干处理方式在光刻法制备的阵列纸芯片微孔中固定显色试剂,然后加入ALP进行显色反应,最后,采用凝胶成像仪和普通照相机成像,读取显色强度(灰度值)进行比色检测。详细考察了显色条件对检测结果的影响,探讨了人血清白蛋白对ALP检测的增色效应,在最佳实验条件下,ALP检测的线性范围为1.5~20 U/L,检出限(3#)为0.78 U/L(n=18),比文献报道中纸芯片上检测ALP方法的检出限低约两个数量级。本方法成功用于实际血清样品检测,测定结果与临床值一致。在此基础上,构建了双色阵列纸芯片,通过颜色的变化实现了ALP的可视化半定量检测。
【作者单位】： 生物医学分析化学教育部重点实验室武汉大学化学与分子科学学院;武汉大学中南医院检验科;
【关键词】： 阵列纸芯片 比色法 碱性磷酸酶
【基金】：国家自然科学基金(No.21205089) 教育部高等学校博士学科点专项科研基金(No.20120141120036)资助项目~~
【分类号】：TN492;O657.3
【正文快照】： 1引言碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是一种水解酶,可催化水解底物分子中的磷酸单酯,广泛存在于细菌、真菌及动物中[1]。血清中ALP水平是诊断肝癌、肝硬化、慢性肝炎等肝类疾病的指标,也是原发性肝癌的肿瘤标志物之一[2,3]。ALP也是酶联免疫吸附分析中常用的一种标记酶

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本文编号：688817