基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸

发布时间：2017-08-22 11:41

  本文关键词：基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸

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【摘要】：目的建立一种同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸浓度的高效液相色谱(HPLC)法,用于评价小鼠给予IDO抑制剂后体内IDO活性。方法血清用6%高氯酸沉淀蛋白法处理,离心后取上清进样,采用标准加入法定量。选用ThermoHypersil GOLD色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为乙腈-醋酸钠(15mmol/L,冰醋酸调pH至4.0),流速1.1 mL/min,柱温30℃,犬尿氨酸和色氨酸的紫外检测波长分别为360 nm和280 nm。结果犬尿氨酸保留时间为6.10 min,线性范围为0.25~10μmol/L,检测限为0.09μmol/L;色氨酸保留时间10.12 min,线性范围为25~1 000μmol/L,检测限为0.25μmol/L。精密度、回收率及稳定性等均符合生物样品定量分析方法验证指导原则的要求,并成功应用于62只小鼠血清犬尿氨酸和色氨酸浓度的测定。结论建立了一种简单、快速、准确的HPLC分析方法,采用标准加入定量方式,可同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸血药浓度,并成功应用于实际生物样本的测定。
【作者单位】： 复旦大学药学院药物分析教研室;复旦大学生命科学学院生物化学与分子生物学系;
【关键词】： 犬尿氨酸 色氨酸 HPLC 血清 标准加入法 小鼠
【基金】：国家自然科学基金(81373396;81573310) 高等学校博士学科点专项科研基金(20130071110037)~~
【分类号】：R965;O657.72
【正文快照】： 色氨酸(tryptophan,Trp)是哺乳类动物合成必需的氨基酸之一,也是构成蛋白质的重要成分,还可以在肝、肾等组织中代谢成为生物活性分子。在哺乳类动物中其主要有两条代谢途径:一是在羟化酶的作用下生成5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT),另一条是生成犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)

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本文编号：718978