烷基化壳聚糖对血液中重要组分结构和功能的影响
本文关键词:烷基化壳聚糖对血液中重要组分结构和功能的影响
更多相关文章: 烷基化壳聚糖 血液相容性 蛋白结构 红细胞 血小板 炎症反应
【摘要】:壳聚糖具有良好的生物相容性,被广泛应用于生物医学领域,但也有一定的局限性,因此对壳聚糖的功能化改性特别是疏水改性成为近年来的研究热点。本研究利用EDC/NHS活化体系,分别采用己酸(HA)、癸酸(DA)和硬脂酸(SA)对壳聚糖上的-NH2进行功能化修饰,合成了可水溶的两亲性壳聚糖衍生物。利用FT-IR和1H NMR对壳聚糖及其衍生物分别进行定性与定量的结构表征,并通过核磁谱图吸收峰面积计算烷基烷基化壳聚糖的取代度。基于以上表征手段,通过改变脂肪酸投料比例分别得到两种接枝度(5%、10%)的三类烷基化壳聚糖:HA-g-CS、DA-g-CS、SA-g-CS。由于生物医用高分子材料通常是通过血液循环系统的携带和运输到达靶向组织而发挥作用的,即便通过别的方式进入人体,高分子及其降解产物都很有可能转移到血液系统中。因此,我们以纯壳聚糖及上述所得的六种烷基化衍生物作为研究对象,分析不同材料对血液中重要组分结构和功能的影响,并对材料的血液相容性进行评价。对烷基化壳聚糖血液相容性的评价分析分别从三方面进行展开。首先,研究材料对血液中重要蛋白结构的影响,通过紫外色谱、荧光色谱、圆二色谱分别对牛血清白蛋白(BSA)、γ球蛋白(γ-Globlulin)、纤维蛋白原(Fibrinogen)的结构进行表征。其次,从红细胞形貌与溶血、凝血途径、血小板激活与聚集、补体系统激活几方面对壳聚糖及其烷基化衍生物的血液相容性进行了分析。最后通过对单核巨噬细胞RAW 264.7的增殖、形貌、凋亡、炎性因子的分泌等生理活性的研究,探讨材料对巨噬细胞炎症相关活性的影响。研究发现接枝链段的长度以及取代度不同的烷基化壳聚糖对上述实验结果均有不同程度的影响,这是由于不同烷基化壳聚糖化学结构不同,其表面静电作用、分子间氢键作用及亲疏水作用均存在差异,从而导致材料与血液不同组分间的相互作用存在差异。
【关键词】:烷基化壳聚糖 血液相容性 蛋白结构 红细胞 血小板 炎症反应
【学位授予单位】:暨南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:O636.1;R318.08
【目录】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-7
- 第一章 绪论7-16
- 1.1. 壳聚糖衍生物的研究进展7-9
- 1.2. 生物医用高分子材料的血液相容性研究进展9-15
- 1.2.1. 引言9-10
- 1.2.2. 生物医用高分子材料的血液相容性评价方法10-15
- 1.3. 研究课题的提出15-16
- 第二章 烷基化壳聚糖的合成与表征16-23
- 2.1. 主要试剂与仪器16-17
- 2.1.1. 主要试剂16-17
- 2.1.2. 主要仪器17
- 2.2. 实验部分17-19
- 2.2.1. 烷基化壳聚糖的合成17-19
- 2.2.2. 烷基化壳聚糖的结构表征19
- 2.3. 结果与讨论19-22
- 2.3.1. FT-IR谱图19-20
- 2.3.2. ~1H NMR谱图20-22
- 2.4. 本章小结22-23
- 第三章 烷基化壳聚糖对血液重要蛋白结构的影响23-40
- 3.1. 主要试剂与仪器24
- 3.1.1. 主要试剂24
- 3.1.2. 主要仪器24
- 3.2. 实验部分24-25
- 3.2.1. 烷基化壳聚糖对牛血清白蛋白(BSA)结构的影响24
- 3.2.2. 烷基化壳聚糖对γ-球蛋白(γ-Globulin)结构的影响24-25
- 3.2.3. 烷基化壳聚糖对纤维蛋白原(Fibrinogen)结构的影响25
- 3.3. 结果与讨论25-39
- 3.3.1. 烷基化壳聚糖对BSA结构的影响26-30
- 3.3.2. 烷基化壳聚糖对γ-Globulin结构的影响30-34
- 3.3.3. 烷基化壳聚糖对Fibrinogen结构的影响34-39
- 3.4. 本章小结39-40
- 第四章 烷基化壳聚糖对红细胞、血小板、凝血及补体系统的影响40-53
- 4.1. 主要试剂与仪器41-42
- 4.1.1. 主要试剂41
- 4.1.2. 主要仪器41-42
- 4.2. 实验部分42-45
- 4.2.1. 烷基化壳聚糖对红细胞的影响42-43
- 4.2.2. 烷基化壳聚糖对凝血功能的影响43
- 4.2.3. 烷基化壳聚糖对血小板性能的影响43-44
- 4.2.4. 烷基化壳聚糖对补体系统的影响44-45
- 4.3. 结果与讨论45-52
- 4.3.1. 烷基化壳聚糖对红细胞的影响45-47
- 4.3.2. 烷基化壳聚糖对凝血功能的影响47-48
- 4.3.3. 烷基化壳聚糖对血小板性能的影响48-51
- 4.3.4. 烷基化壳聚糖对补体系统的影响51-52
- 4.4. 本章小结52-53
- 第五章 烷基化壳聚糖对巨噬细胞活性的影响53-70
- 5.1. 主要试剂与仪器54-55
- 5.1.1. 主要试剂54-55
- 5.1.2. 主要仪器55
- 5.2. 实验部分55-59
- 5.2.1. 细胞培养55-56
- 5.2.2. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 增殖活性的影响56
- 5.2.3. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 形貌的影响56-57
- 5.2.4. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 细胞周期的影响57-58
- 5.2.5. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 凋亡的影响58
- 5.2.6. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 活性氧含量的影响58
- 5.2.7. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 线粒体膜电位的影响58-59
- 5.2.8. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 分泌的因子(TNF-α、MCP-1)的影响59
- 5.3. 结果与讨论59-69
- 5.3.1. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 增殖活性的影响59-60
- 5.3.2. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 形貌的影响60-62
- 5.3.3. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 细胞周期的影响62-63
- 5.3.4. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 凋亡的影响63-65
- 5.3.5. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 活性氧含量的影响65-66
- 5.3.6. 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 线粒体跨膜电位的影响66-67
- 5.3.7 烷基化壳聚糖对RAW 264.7 分泌炎性因子的影响67-69
- 5.4. 本章小结69-70
- 第六章 全文总结70-71
- 参考文献71-78
- 致谢78
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