硅基银片的等离子体荧光增强效应及其在蛋白质核酸检测中的应用

发布时间：2017-10-08 16:20

  本文关键词：硅基银片的等离子体荧光增强效应及其在蛋白质核酸检测中的应用

  更多相关文章： 金属表面等离子体荧光增强 荧光免疫分析 Ag@Si基片 蛋白质检测 核酸检测

【摘要】：荧光免疫分析具有高灵敏度、定量化、快速分析以及对样品损坏小等优点,然而常用的荧光染料,尤其在近红外波段,其量子产率较低,这在一定程度上限制了它的实际应用,因此,提高荧光免疫分析技术中的荧光强度是一个重要的实际问题;另一方面,金属表面等离子体荧光增强效应已在生物传感器和生物医学检测等实际应用中显示了巨大的潜力,它在提高荧光信号强度、增强探测灵敏度等方面展示了优良的效果。最近有研究证明,与传统的玻璃基底的金属纳米结构薄膜相比,以半导体硅片作为基底的杂化金属纳米结构薄膜具备更强的表面增强拉曼散射(SERS)效应。因此,在本论文的工作中,我们进一步研究了此类硅基底金属纳米岛状结构杂化材料—硅基银膜(即Ag@Si基片)在荧光增强方面,尤其是改进传统免疫荧光检测方面的作用。多色蛋白质免疫荧光检测结果显示,Ag@Si基片具有波长依赖的荧光增强能力,即,在532 nm波长范围荧光强度增强约1.2倍,然而在800 nm波长增强倍数达到57倍左右。此外,对于传统的蛋白质或核酸荧光标记的细胞或组织切片样品,Ag@Si基片能够将其荧光强度信号提高3.0至4.1倍(800 nm波长范围),并令荧光显微照片的信噪比获得明显改善。总之,此类Ag@Si基片能够方便的应用于传统的免疫荧光检测样品,展现出良好的适应性、重要的增强荧光信号及改进信噪比的能力,这些优点展示了其不仅在生物研究、而且在医疗领域的巨大的实际应用潜力。
【关键词】：金属表面等离子体荧光增强 荧光免疫分析 Ag@Si基片 蛋白质检测 核酸检测
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.3
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 前言10-22
• 1.1 金属增强荧光及其增强机制10-14
• 1.1.1 金属增强荧光10-11
• 1.1.2 金属增强荧光的荧光增强机制11-14
• 1.2 影响金属增强荧光效果的因素14-18
• 1.2.1 金属纳米材料种类14-15
• 1.2.2 金属与荧光分子间的距离15-17
• 1.2.3 金属纳米粒子的形貌和尺寸17-18
• 1.3 固体银膜增强荧光的研究18-20
• 1.3.1 固体银膜18-19
• 1.3.2. 硅基银膜（Ag@Si）等离子体基片19-20
• 1.4 本论文的主要研究内容20-22
• 第二章 实验技术与方法22-28
• 2.1 实验表征技术22-26
• 2.1.1 微阵列可见光及近红外光扫描成像系统22-23
• 2.1.2 荧光显微镜23-26
• 2.2 样品制备方法26-28
• 2.2.1 免疫组化法26-27
• 2.2.2 荧光原位杂交技术27-28
• 第三章 蛋白质与核酸检测中的Ag@Si基片等离子体共振增强荧光成像28-47
• 3.1 研究背景28-29
• 3.2 实验材料29-30
• 3.2.1 蛋白分析材料29
• 3.2.2 荧光免疫组化（IHC）标记材料29
• 3.2.3 荧光原位杂交（FISH）标记材料29-30
• 3.2.4 实验使用细胞30
• 3.3 实验方法30-33
• 3.3.1 Ag@Si表面以及纯硅片表面的微阵列刻印及分析过程30
• 3.3.2 荧光免疫组化标记和荧光原位杂交标记细胞与组织切片样品的制作过程30-32
• 3.3.3 扫描仪和显微镜的荧光表征32
• 3.3.4 数据分析32-33
• 3.4 实验结果33-47
• 3.4.1 等离子体Ag@Si基片的表征33-34
• 3.4.2 蛋白质微阵列分析中Ag@Si片的增强影响34-36
• 3.4.3 Ag@Si基片在免疫组化法标记细胞与组织切片中的荧光增强效果36-42
• 3.4.4 Ag@Si基片在荧光原位杂交组织样品中的增强效应42-45
• 3.4.5 讨论45-47
• 第四章 Ag@Si基片对SiNPs的荧光增强实验47-56
• 4.1 研究背景47
• 4.2 实验材料47-48
• 4.3 实验方法48
• 4.3.1 硅量子点的合成48
• 4.3.2 硅量子点混合固体膜制作48
• 4.3.3 PS小球混合固体膜制作48
• 4.4 结果分析48-55
• 4.4.1 硅量子点以及PS小球的表征图48-49
• 4.4.2 不同混合膜在纯硅片与Ag@Si基片表面的荧光强度比较49-55
• 4.5 本章总结55-56
• 第五章 全文总结56-57
• 参考文献57-65
• 攻读学位期间公开发表的论文及科研成果65-66
• 致谢66-67

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本文编号：995045