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新型转基因抗草甘膦玉米的培育及转基因玉米安全控制技术的研究.pdf 全文免

发布时间:2017-01-05 13:17

  本文关键词:新型转基因抗草甘膦玉米的培育及转基因玉米安全控制技术的研究,,由笔耕文化传播整理发布。


网友1322891254近日为您收集整理了关于新型转基因抗草甘膦玉米的培育及转基因玉米安全控制技术的研究的文档,希望对您的工作和学习有所帮助。以下是文档介绍:带有两个GIO基因的pCAMBll300载体通过电转法导入农杆菌LB4404中。采用农杆菌介导的玉米转基因方法我们共获得了208个转基因抗草甘膦玉米株系。研究中,通过PCR检测、Southemblot、Westernblot、Tail.PCR以及草甘膦抗性实验对所获得的转基因株系进行了分子生物的鉴定。结果表明,在所获得的转基因玉米株系中株系Anti.G.162不但对草甘膦表现出了高水平的抗性,而且为单拷贝株系,并且其T2代在农艺性状上与非转基因玉米相比并没有明显的差异。该株系在浙江的试验表明,其抗性水平至少和Monsanto的相同。因此在抗草甘膦转基因农作物开放以后,我们研发的产品能够和Monsanto的产品进行竞争,从而保护我国的转基因农作物种业。筛选出的株系可以作为良好的转基因抗草甘膦玉米,为下一步的玉米育种工作提供材料。浙江大学博士学位论文摘要(2)转基因玉米因为异花授粉,花粉飘散的距离很远,容易造成基因漂移,如何进行安全控制一直是转基因安全控制研究的重点。根据本课题组早期转基因水稻的安全控制技术思路,我们也研究了一种在转基因玉米上适用的安全控制技术。本研究中,采用RNA干扰的方法抑制玉米体内烟嘧磺隆解毒酶基因CYP81A9的表达,从而使转基因玉米对烟嘧磺隆敏感;同时引入一个抗草甘膦基因GIO,这样所获得的转基因玉米能被烟嘧磺隆选择性杀死但对草甘膦具有抗性,而常规玉米由于本身对烟嘧磺隆不敏感所以不会受到任何影响。本论文中,最终所获得的转基因玉米株系R450.58能被正常大田使用浓度的烟嘧磺隆杀死。上述结果表明,本研究发展的这种可被选择性灭杀的转基因玉米技术是非常简单并且方便的。事实上,我们可以将任意我们所感兴趣的基因导入到本研究所用到的T-DNA载体骨架上,从而培育出可被选择性控制的转基因玉米,进而根据我们的意愿通过喷施两种常用的除草剂轻易的选择出或是灭杀掉转基因玉米植株。这一技术的出现,将为我国发展更加安全、可靠、可控的转基因生物提供技术上的保障和支持。关键词:转基因玉米,抗草甘膦,烟嘧磺隆,icallymodified(GM)cornwasoneoftheinitiallaunchedandmarketedcropsinthehistoryofagriculture,isalsothemostwidelyplantedGMgraincropsintheworld.Inrecentyears,merciallyavailableisglyphosatetolerance.Activelydevelopinganewgenerationofglyphosate.resistantCOrnvarietieswithpatents,petitionandchallenges.Therearethreebasicstrategiesthathavebeenevaluatedinordertointroduceglyphosateresistanceintocropspecies:over-expressionofthesensitivetargetenzyme,detoxificationoftheglyphosatemoleculeandexpressionofaninsensitiveformofthetargetenzyme.Inthisstudy,aninsensitiveEPSPsgenewastransferedintoCOrntoachivethebestevent.However,eptanceofsuchseedlinesandfoodproducts.Inspiteofthestrictpolicyintransgenicregulation,urredfromtimetotimebasedoncontrolmethodsofphysicalseparationandisolation.Soitisveryimportanttofmdnewstrategiestopreventthepotentialhazardsoftransgenespreading.Inthisstudy,wereportabuilt-ornTheresultsareasfollows:(1)usradioduransR1(GI:8469109)inourlaboratorypreviously.icanalysisrevealedthatthisEPSPSbelongsneithertoClassnortoClassIIEPSPSenzymes.TheGIODNAsequenceWassynthesizedtobeoptimizedforexpressionincorn.InordertodirecttheEPSPStothechloroplast,achloroplasttransitpeptidefromtheacetohydroxyacidsynthaseofZeamaysWasaddedinthe5’endoftheGIOgene.TheT-DNAplasmidp1300-pZmUbi-G10-p35S-actintron-G10containingtwoGIOgenesunderthecontrolofacornubiquitinpromoterandacauliflowermosaicvirus35Spromoter,separately.ItWastransformedintocornviaastandardAgrobacteriumtumefaciens-mediatedmethod.InOurtransformation,totalof208V

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本文编号:235139

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