紫杉醇对肝癌细胞干性基因表达的调控及恶性行为的影响
发布时间：2021-12-11 07:46
目的:细胞进行有丝分裂时需要微管聚合和解聚的正常动态平衡,从而在有丝分裂的后期染色体能够随微管解聚产生的拉力和微管聚合产生的推力,向两极移动。紫杉醇通过与微管蛋白结合影响癌细胞在有丝分裂时的纺锤体形成,从而抑制了癌细胞分裂和增殖。同时紫杉类药物在较高浓度下,可以起到一种增敏作用,即对微管的聚合作用有加强作用,这样导致微管的解聚作用被严重抑制,抑制肿瘤细胞的增殖,继而诱导肿瘤细胞死亡。本课题利用紫杉醇处理肝癌细胞,观察紫杉醇对肝癌细胞干性基因表达的调控以及对肝癌细胞恶性行为的影响,从而探讨紫杉醇对肝癌治疗的潜在机制,使紫杉醇能够靶向治疗高表达某种干性基因或者肿瘤标志物的肝癌,提高肝癌的治愈率及肝癌患者的生存质量。方法:使用不同浓度的紫杉醇作用于正常肝细胞L-02、肝癌细胞HLE和Bel7402 24 h及48 h后,观察细胞的生长情况,采用MTT法筛选出紫杉醇的最佳作用浓度及作用时间;通过Transwell小室迁移实验研究紫杉醇对正常肝细胞L-02及肝癌细胞HLE、Bel7402迁移能力的影响;利用蛋白质免疫印迹实验观察紫杉醇对L-02、HLE、Bel7402细胞中干性基因AFP、Sox...
【文章来源】：海南医学院海南省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞计数图
图 3.1 不同浓度的紫杉醇处理 L-02、HLE、Bel7402 24h 及 48h 对细胞生长的作用A.不同浓度紫杉醇分别作用于 L-02、HLE、Bel7402 细胞 24 h 后在波长 490 nm 处测得吸光值，B.不同浓度紫杉醇分别作用于 L-02、HLE、Bel7402 细胞 48 h 后在波长 490 nm 处测得吸光值，横坐标为紫杉醇的不同浓度，纵坐标为细胞增殖率，细胞增殖率（%）=加药细胞组吸光值/正常组吸光值×100%，结果为三次独立重复实验，***代表 P＜0.001，相比对照组有统计学意义。3.2 紫杉醇抑制肝癌细胞干性基因的表达通过 Western blot 技术对不同细胞中 AFP、Sox2、c-Myc、Klf4、EpCAM、Oct4 等基因的表达情况进行检测，如图 3.2-A，与未用紫杉醇作用的细胞相比较，20 μg/mL 紫杉醇作用 24 h 的 L-02、HLE、Bel7402 细胞中，AFP、Sox2、c-Myc、
图 3.2 Western blot 检测 L-02、HLE、Bel7402 细胞中干性基因表达的情况A. Western blot 检测未用紫杉醇处理的 L-02、HLE、Bel7402 细胞和用 20 μg/mL 紫杉醇作用 24 h 的 L-02、HLE、Bel7402 细胞的 AFP、Sox2、c-Myc、Klf4、EpCAM、Oct4 等蛋白的表达情况的检测。B. 柱状图为 L-02 细胞干性基因蛋白表达量与内参 GAPDH 灰度扫描值的比值结果。C.柱状图为 HLE 细胞干性基因蛋白表达量与内参 GAPDH 灰度扫描值的比值结果。 D. 柱状图为 Bel7402 细胞干性基因蛋白表达量与内参 GAPDH 灰度扫描值的比值结果，结果为三次独立重复实验，**代表 P＜0.01，***代表 P＜0.001，相比对照组，有统计学意义。3.3 紫杉醇抑制肝癌细胞恶性行为3.3.1 紫杉醇抑制肝癌细胞的迁移对 L-02、HLE、Bel7402 三种细胞利用 Transwell 小室进行迁移实验检测，
【参考文献】：
期刊论文
[1]肝癌干细胞表面标记物及靶向治疗的研究进展[J]. 马睿玲,张秋菊,王新斌. 现代肿瘤医学. 2019(08)
[2]原发性肝癌血清蛋白质标志物研究进展[J]. 尹树君,金琦智,马玉靖,汪旭,董科. 实用医院临床杂志. 2019(02)
[3]围手术期介入治疗对伽玛刀治疗肝癌肝硬化临床疗效及预后的影响[J]. 王宏,夏永寿,加静,苏海川,魏鹏飞. 现代生物医学进展. 2018(24)
[4]紫杉醇对肝癌细胞HepG2和大鼠原代培养肝细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究[J]. 徐雅玲,梁菁. 中国药理学通报. 2018(07)
[5]天然药物紫杉醇的研究进展[J]. 王俊松. 当代化工研究. 2018(01)
[6]紫杉醇临床应用及安全性研究进展[J]. 于莹,任耘. 天津药学. 2017(02)
[7]紫杉醇和姜黄素在肿瘤治疗中的联合应用[J]. 蒲新霖,赵领. 西南军医. 2017(02)
[8]抗癌药物-紫杉醇合成和应用研究进展[J]. 于海涛. 黑龙江科技信息. 2017(05)
[9]龙胆苦苷对人肝癌HepG2细胞的抑制作用[J]. 赵忠伟,韩鹏. 中国老年学杂志. 2016(24)
[10]奈达铂联合紫杉醇同期放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效分析[J]. 时明宇. 中国疗养医学. 2016(06)
硕士论文
[1]miR-223-5p对肝癌细胞株BEL-7402紫杉醇耐药性的影响[D]. 耿蕴峰.河北医科大学 2016
[2]GSN在广西肝癌高危队列人群血清中的表达及其临床应用价值[D]. 徐军女.广西医科大学 2014
[3]姜黄素与紫杉醇联用对人子宫内膜癌细胞增殖的影响及其机制研究[D]. 杨晓霞.山西医科大学 2013
本文编号：3534283
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【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞计数图
图 3.1 不同浓度的紫杉醇处理 L-02、HLE、Bel7402 24h 及 48h 对细胞生长的作用A.不同浓度紫杉醇分别作用于 L-02、HLE、Bel7402 细胞 24 h 后在波长 490 nm 处测得吸光值，B.不同浓度紫杉醇分别作用于 L-02、HLE、Bel7402 细胞 48 h 后在波长 490 nm 处测得吸光值，横坐标为紫杉醇的不同浓度，纵坐标为细胞增殖率，细胞增殖率（%）=加药细胞组吸光值/正常组吸光值×100%，结果为三次独立重复实验，***代表 P＜0.001，相比对照组有统计学意义。3.2 紫杉醇抑制肝癌细胞干性基因的表达通过 Western blot 技术对不同细胞中 AFP、Sox2、c-Myc、Klf4、EpCAM、Oct4 等基因的表达情况进行检测，如图 3.2-A，与未用紫杉醇作用的细胞相比较，20 μg/mL 紫杉醇作用 24 h 的 L-02、HLE、Bel7402 细胞中，AFP、Sox2、c-Myc、
图 3.2 Western blot 检测 L-02、HLE、Bel7402 细胞中干性基因表达的情况A. Western blot 检测未用紫杉醇处理的 L-02、HLE、Bel7402 细胞和用 20 μg/mL 紫杉醇作用 24 h 的 L-02、HLE、Bel7402 细胞的 AFP、Sox2、c-Myc、Klf4、EpCAM、Oct4 等蛋白的表达情况的检测。B. 柱状图为 L-02 细胞干性基因蛋白表达量与内参 GAPDH 灰度扫描值的比值结果。C.柱状图为 HLE 细胞干性基因蛋白表达量与内参 GAPDH 灰度扫描值的比值结果。 D. 柱状图为 Bel7402 细胞干性基因蛋白表达量与内参 GAPDH 灰度扫描值的比值结果，结果为三次独立重复实验，**代表 P＜0.01，***代表 P＜0.001，相比对照组，有统计学意义。3.3 紫杉醇抑制肝癌细胞恶性行为3.3.1 紫杉醇抑制肝癌细胞的迁移对 L-02、HLE、Bel7402 三种细胞利用 Transwell 小室进行迁移实验检测，
【参考文献】：
期刊论文
[1]肝癌干细胞表面标记物及靶向治疗的研究进展[J]. 马睿玲,张秋菊,王新斌. 现代肿瘤医学. 2019(08)
[2]原发性肝癌血清蛋白质标志物研究进展[J]. 尹树君,金琦智,马玉靖,汪旭,董科. 实用医院临床杂志. 2019(02)
[3]围手术期介入治疗对伽玛刀治疗肝癌肝硬化临床疗效及预后的影响[J]. 王宏,夏永寿,加静,苏海川,魏鹏飞. 现代生物医学进展. 2018(24)
[4]紫杉醇对肝癌细胞HepG2和大鼠原代培养肝细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究[J]. 徐雅玲,梁菁. 中国药理学通报. 2018(07)
[5]天然药物紫杉醇的研究进展[J]. 王俊松. 当代化工研究. 2018(01)
[6]紫杉醇临床应用及安全性研究进展[J]. 于莹,任耘. 天津药学. 2017(02)
[7]紫杉醇和姜黄素在肿瘤治疗中的联合应用[J]. 蒲新霖,赵领. 西南军医. 2017(02)
[8]抗癌药物-紫杉醇合成和应用研究进展[J]. 于海涛. 黑龙江科技信息. 2017(05)
[9]龙胆苦苷对人肝癌HepG2细胞的抑制作用[J]. 赵忠伟,韩鹏. 中国老年学杂志. 2016(24)
[10]奈达铂联合紫杉醇同期放化疗治疗局部晚期鼻咽癌的疗效分析[J]. 时明宇. 中国疗养医学. 2016(06)
硕士论文
[1]miR-223-5p对肝癌细胞株BEL-7402紫杉醇耐药性的影响[D]. 耿蕴峰.河北医科大学 2016
[2]GSN在广西肝癌高危队列人群血清中的表达及其临床应用价值[D]. 徐军女.广西医科大学 2014
[3]姜黄素与紫杉醇联用对人子宫内膜癌细胞增殖的影响及其机制研究[D]. 杨晓霞.山西医科大学 2013
本文编号：3534283
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