外源NO对伽师瓜AOX基因克隆表达及抗氰呼吸的影响

发布时间：2021-12-23 10:54

　　为了探究外源一氧化氮（nitric oxide,NO）熏蒸处理对伽师瓜（Cucumis melo L.）采后贮藏过程中AOX基因表达及抗氰呼吸途径的影响,以伽师瓜为试材,采用外源60μL/L NO熏蒸3 h,以不充入NO气体作为对照,在（5±0.5）℃条件下贮藏49 d。根据甜瓜基因组数据库,通过EST设计引物,克隆获得伽师瓜AOX基因全长序列。得到的基因片段同其他物种的AOX基因具有高度的同源性,命名为Cm AOX。通过拼接获得AOX基因的c DNA全长序列,基因c DNA全长为1300 bp,开放阅读框架为1042 bp,拟编码346个氨基酸,预测分子量为39606.6 Da,等电点为9.00。该基因已在Gene Bank登录,登录号为:KM273124。通过荧光定量分析及抗氰呼吸速率的测定表明,经60μL/L NO处理果实的Cm AOX的表达量和抗氰呼吸速率明显高于对照果实。说明NO处理对伽师瓜采后贮藏过程中抗氰呼吸途径的影响可能与其调控AOX基因的表达密切相关。 

【文章来源】：食品工业科技. 2017,38(16)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 伽师瓜的处理方法
        1.2.2 伽师瓜果实总RNA的提取
        1.2.3 AOX基因片段的克隆
        1.2.4 伽师瓜果实AOX c DNA全长序列的克隆与分析
        1.2.5 实时荧光定量PCR分析
        1.2.6 伽师瓜果实抗氰呼吸速率的测定
2 结果与分析
    2.1 伽师瓜总RNA电泳图
    2.2 RT-PCR扩增伽师瓜果实AOX基因片段
    2.3 伽师瓜果实AOX基因c DNA全长扩增
    2.4 序列分析
        2.4.1 Cm AOX基因的氨基酸序列比对分析
        2.4.2 伽师瓜交替氧化酶基因Cm AOX的进化树分析
        2.4.3 Cm AOX蛋白的三维结构预测
    2.5 NO处理对伽师瓜果实AOX基因表达的影响
    2.6 NO处理对伽师瓜果实抗氰呼吸速率的影响
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3548344