三个播散型卡介苗感染家系致病基因的分析及功能研究

发布时间：2021-12-29 02:33

　　播散型卡介苗感染疾病是一种罕见的先天性免疫缺陷疾病,患者对卡介苗（BCG）、非结核分枝杆菌（NTM）等弱致病分枝杆菌易感。本文对三个中国播散型卡介苗感染疾病家系进行遗传学分析,通过一代测序的方法寻找每个家系的致病基因,再通过分子生物学方法对该基因的生化功能进行研究,从而阐明播散型卡介苗感染疾病发生的相关的致病机理。对三个患者的致病基因进行突变筛选,我们发现三个无血缘关系的患者的致病基因IL12RB1均携带新的复合杂合突变,患者的父母各携带IL12RB1基因的一个杂合突变。家系1的患者携带IL12RB1基因的复合杂合突变:c.635G>A（R212Q）和缺失突变（c.764delG）,家系2的患者携带IL12RB1基因的复合杂合突:c.632G>C（R211P）和c.847C>T（R283X）、家系3的患者携带IL12RB1基因的复合杂合突:c.64G>A（A22T）和c.1673₁674insGAGCTTCCTGAG。为了进一步研究这些突变是如何影响IL12Rβ1蛋白的功能,我们构建上述突变型和野生型的人源IL12RB1基因真核表达载体,将... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

三个播散型卡介苗感染家系系谱图

）PCR 反应体系据 Taq 酶的反应条件，设计优化 PCR 反应体系，如下表 4 所示：表 4：PCR 体系（50μL）Table4：PCR systerm（50μL）PCR反应组分 用量（μL）10×PCR Buffer（Mg2+15 mM） 5DNA 模板（20ng/μL） 1dNTP(2.5mmol/L) 4primers（Forward/Reverse）（10μmol/L） 1/1Taq酶（5U/μL） 0.5ddH2O 补齐至50）PCR 反应程序序设定如下：

PCR反应程序Fig.3：ReactionprogramofPCR


本文编号：3555222