褐黄血蜱Cystatin家族的基因克
发布时间：2022-01-06 16:44
Cystatin是一种能抑制木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶活性的半胱氨酸蛋白酶抑制剂,有4个亚家族,其中家族2具有抗原虫、抑制细胞凋亡等功能。在蜱类的生长发育过程中,唾液腺、卵巢等器官可分泌数种家族2,参与蜱吸血、血餐消化、胚胎发育等生理过程。本研究详细研究了褐黄血蜱Hfcyst-1、Hfcyst-2、Hfcyst-3和Hfcyst-4的基因、表达和功能。1.以RACE法扩增Contig3911、Contig8700、Contig7143、Contig8976的5’和3’端,得Hfcyst-1、Hfcyst-2、Hfcyst-3和Hfcyst-4的全长cDNA。Hfcyst-1全长738 bp,ORF大小429 bp,编码蛋白142aa;Hfcyst-2全长715 bp,ORF大小426 bp,编码蛋白141aa;Hfcyst-3全长722 bp,ORF大小426 bp,编码蛋白141aa;Hfcyst-4全长776 bp,ORF大小426 bp,编码蛋白141aa。结构分析表明,它们均属于Cystatin家族2。2.RT-PCR法测定Hfcyst-1、Hfcyst-2、Hfcyst-3和...
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Cystatin对半胱氨酸蛋白酶抑制活性示意图
13bp，3"端产物大小为220bp。图2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE扩增产物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE扩增结果；2：3"-RACE扩增结果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接获得Contig3911所在cDNA全长（命名为Hfcyst-1，登录号为MK949070），见图2-2。由图可知，Hfcyst-1全长738bp，5"-UTR（非编码区）长149bp，3"-UTR长160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。图2-2Hfcyst-1cDNA全长序列（图中加直线下划线的是5"-RACEInner引物，加波浪线下划线的是3"-RACEInner，阴影部分为5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE扩增RACE法扩增Contig8700的5"和3"端结果见图2-2。如图显示，5"端产物大小为180bp，3"端产物大小为480bp。
13bp，3"端产物大小为220bp。图2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE扩增产物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE扩增结果；2：3"-RACE扩增结果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接获得Contig3911所在cDNA全长（命名为Hfcyst-1，登录号为MK949070），见图2-2。由图可知，Hfcyst-1全长738bp，5"-UTR（非编码区）长149bp，3"-UTR长160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。图2-2Hfcyst-1cDNA全长序列（图中加直线下划线的是5"-RACEInner引物，加波浪线下划线的是3"-RACEInner，阴影部分为5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE扩增RACE法扩增Contig8700的5"和3"端结果见图2-2。如图显示，5"端产物大小为180bp，3"端产物大小为480bp。
【参考文献】：
期刊论文
[1]褐黄血蜱卵蛋白质组分析[J]. 徐律,程天印. 畜牧兽医学报. 2019(03)
[2]褐黄血蜱cystatin基因全长的克隆及原核表达研究[J]. 和小明,刘磊. 黑龙江畜牧兽医. 2018(23)
[3]褐黄血蜱唾液菌群结构分析[J]. 和小明,唐欢,程天印. 中国预防兽医学报. 2016(07)
[4]褐黄血蜱的形态学与分子生物学鉴定[J]. 严芬,程天印. 中国兽医学报. 2015(06)
[5]褐黄血蜱中肠内容物菌群结构分析[J]. 杨亚,刘进辉,程天印. 中国预防兽医学报. 2015(04)
[6]硬蜱常用分子分类技术研究进展[J]. 杨亚,刘进辉,伏健,严芬,程天印. 动物医学进展. 2014(11)
[7]褐黄血蜱与铃头血蜱的分子生物学鉴定[J]. 高东亚,田俊华,覃新程,王剑波,康雁君,张景山,周敦金,张居农,张永振. 中国媒介生物学及控制杂志. 2012(04)
[8]家养动物体表蜱中发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒分离及鉴定[J]. 姜晓林,王显军,李建东,丁淑军,张全福,曲靖,张硕,李川,芜为,姜梅,梁米芳,毕振强,李德新. 病毒学报. 2012(03)
[9]半胱氨酸蛋白酶抑制剂与免疫调节[J]. 郑海音. 国外医学(免疫学分册). 2005(03)
[10]寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的类型及生物学功能[J]. 张晓艳,林建银. 国外医学(寄生虫病分册). 2005(02)
本文编号：3572814
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Cystatin对半胱氨酸蛋白酶抑制活性示意图
13bp，3"端产物大小为220bp。图2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE扩增产物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE扩增结果；2：3"-RACE扩增结果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接获得Contig3911所在cDNA全长（命名为Hfcyst-1，登录号为MK949070），见图2-2。由图可知，Hfcyst-1全长738bp，5"-UTR（非编码区）长149bp，3"-UTR长160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。图2-2Hfcyst-1cDNA全长序列（图中加直线下划线的是5"-RACEInner引物，加波浪线下划线的是3"-RACEInner，阴影部分为5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE扩增RACE法扩增Contig8700的5"和3"端结果见图2-2。如图显示，5"端产物大小为180bp，3"端产物大小为480bp。
13bp，3"端产物大小为220bp。图2-1Contig3911的5"-RACE和3"-RACE扩增产物（M：DL2000Marker；1：5"-RACE扩增结果；2：3"-RACE扩增结果）Fig.2-1Amplificationproductsof5"-RACEand3"-RACEofContig3911（M:DL2000Marker;1:5"-RACEamplificationresults;2:3"-RACEamplificationresults）拼接获得Contig3911所在cDNA全长（命名为Hfcyst-1，登录号为MK949070），见图2-2。由图可知，Hfcyst-1全长738bp，5"-UTR（非编码区）长149bp，3"-UTR长160bp，ORF大小429bp，3"末端具有AATAAA和PolyA。图2-2Hfcyst-1cDNA全长序列（图中加直线下划线的是5"-RACEInner引物，加波浪线下划线的是3"-RACEInner，阴影部分为5"和3"-末端序列）Fig.2-2Full-lengthsequenceofHfcyst-1cDNA（Thelineunderlinedwiththelineisthe5"-RACEInnerprimer,thewavylineunderlinedthe3"-RACEInner,andtheshadedpartisthe5"and3"-endsequences.）2.2.2.2Contig8700的5"-RACE和3"-RACE扩增RACE法扩增Contig8700的5"和3"端结果见图2-2。如图显示，5"端产物大小为180bp，3"端产物大小为480bp。
【参考文献】：
期刊论文
[1]褐黄血蜱卵蛋白质组分析[J]. 徐律,程天印. 畜牧兽医学报. 2019(03)
[2]褐黄血蜱cystatin基因全长的克隆及原核表达研究[J]. 和小明,刘磊. 黑龙江畜牧兽医. 2018(23)
[3]褐黄血蜱唾液菌群结构分析[J]. 和小明,唐欢,程天印. 中国预防兽医学报. 2016(07)
[4]褐黄血蜱的形态学与分子生物学鉴定[J]. 严芬,程天印. 中国兽医学报. 2015(06)
[5]褐黄血蜱中肠内容物菌群结构分析[J]. 杨亚,刘进辉,程天印. 中国预防兽医学报. 2015(04)
[6]硬蜱常用分子分类技术研究进展[J]. 杨亚,刘进辉,伏健,严芬,程天印. 动物医学进展. 2014(11)
[7]褐黄血蜱与铃头血蜱的分子生物学鉴定[J]. 高东亚,田俊华,覃新程,王剑波,康雁君,张景山,周敦金,张居农,张永振. 中国媒介生物学及控制杂志. 2012(04)
[8]家养动物体表蜱中发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒分离及鉴定[J]. 姜晓林,王显军,李建东,丁淑军,张全福,曲靖,张硕,李川,芜为,姜梅,梁米芳,毕振强,李德新. 病毒学报. 2012(03)
[9]半胱氨酸蛋白酶抑制剂与免疫调节[J]. 郑海音. 国外医学(免疫学分册). 2005(03)
[10]寄生虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂的类型及生物学功能[J]. 张晓艳,林建银. 国外医学(寄生虫病分册). 2005(02)
本文编号：3572814
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