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稻曲病菌UvustA、UvPmk1和UvCDC2基因的功能研究

发布时间:2022-01-20 03:13
  水稻稻曲病是由稻曲菌(Ustilaginoidea virens)侵染引起的水稻穗部病害,研究其致病机理对研究植物与病原物的互作机制和寻求新的化学防治靶标具有重要意义。本研究对稻曲菌UvustA、UvPmk1和UvCDC2基因进行了功能分析,主要研究结果如下:1.为了验证UvustA是否参与稻曲菌素A合成,对UvustA基因进行了敲除和互补,研究结果表明敲除和互补转化子在菌落生长速度、产孢量和对水稻晚籼98的致病力上与野生型菌株均无显著差异。采用LC-MS对野生型菌株、敲除突变体和去除UvustA信号肽的突变体侵染水稻形成稻曲球中的稻曲菌素A进行定性分析,检测结果表明在野生型菌株接种形成的稻曲球中存在稻曲菌素A,而在敲除突变体以及去除UvustA信号肽的突变体接种形成的稻曲球中均未检测到稻曲菌素A的存在;通过信号肽预测、融合蛋白表达定位及western bloting分析发现,UvustA为分泌蛋白,可以分泌到胞外,推测基因UvustA参与稻曲菌素A的形成,但与稻曲球形成无关。2.对UvPmk1基因的功能分析结果表明,UvPmk1基因的缺失导致稻曲菌产孢量明显下降,对渗透胁迫、细胞壁完... 

【文章来源】:华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:110 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

稻曲病菌UvustA、UvPmk1和UvCDC2基因的功能研究


稻曲病菌侵染循环主要阶段(Zhangetal.,2014)

基因组序列,菌素,G结构


vPdeH 与稻曲菌产孢,致病相关(Guo et al.,2019)。Liang 等利用 CRISPR-C术成功高效的获得了 USTA 和 UvSTL2 突变体(Liang et al., 2018)。Li 等 UvPKS1 负责稻曲菌中黑粉菌素的生物合成(Li et al., 2019)。此外,Sun道了稻曲菌的基因组序列并预测了可能的效应子(Sun et al., 2013)。Fang发现效应子 SCRE2 抑制植物免疫并调节对水稻的毒力(Fang et al.,2019)力的推进了稻曲菌分子遗传水平上的研究。 稻曲菌素的研究进展.1 稻曲菌素的类型稻曲球中含有多种次生代谢物,目前研究较多的有稻曲菌素(ustiloxins)粉菌素(ustilaginoidins),两者均是从水稻稻曲球中分离鉴定出来的 (Lu et 014; Zhou et al., 2012)。稻曲菌素属于具有醚键的 13 元环核心结构的环肽。鉴定出的稻曲菌素有 6 种,分别为稻曲菌素 A,B,C,D,F 和 G(图 1-2)

稻曲病菌,系统发育树


华中农业大学 2019 届硕士研究生学位(毕业)论文2 结果与分析2.1 UvustA 基因序列分析及系统发育树构建根据 Tsukui 等人预测的稻曲菌素合成基因簇,我们针对其中一个编码前体蛋白的基因 UvustA 进行研究。PCR 扩增及基因组数据库显示稻曲菌 UvustA 基因全长 457bp,包含 1 个外显子,编码 134aa 的蛋白(图 2-3 A)。含有两个 RPT1结构域。系统进化分析表明,UvustA 基因编码的蛋白与青霉(Penicillium freii),黄曲霉(Aspergillus flavus),曲霉(Aspergillus oryzae)和黑曲霉(Aspergillus niger)的蛋白聚为一簇,而与黄色镰刀菌(Fusarium culmorum)的 ustB 进化关系较远(图 2-3 B)。A

【参考文献】:
期刊论文
[1]江苏水稻稻曲病综合防控技术[J]. 张俊喜,成晓松,高波,霍金兰,李红阳,宋勇兵,顾慧玲,孙星星,马晶晶,王凯.  大麦与谷类科学. 2018(04)
[2]大豆疫霉细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶的生物信息分析[J]. 张蕾,艾嘉,韩毅强,王彦杰,晏磊,高亚梅,王伟东.  江苏农业科学. 2018(04)
[3]南部县水稻稻曲病严重发生的原因及防控对策[J]. 焦全爱.  四川农业科技. 2017(08)
[4]国内外水稻稻曲病研究进展[J]. 伏荣桃,王剑,卢代华,龚学书,张鸿.  中国农学通报. 2016(12)
[5]咸宁市2015年稻曲病发生原因及防治对策[J]. 王娟,黄怡兵,胡宇舟.  湖北植保. 2016(02)
[6]高效液相色谱-高分辨质谱法鉴定水稻稻曲病菌毒素[J]. 卞英芳,于莎莎,牟仁祥,曹赵云,孙伟华,杨欢,林晓燕,陈铭学.  色谱. 2015(10)
[7]稻曲毒素A的相对含量分析及其与致病力的相关性[J]. 尹小乐,陈志谊,刘永锋,于俊杰,李燕,俞咪娜.  中国农业科学. 2012(22)
[8]实时荧光定量PCR筛选稻曲病菌内参基因[J]. 顾志敏,丁正中,陈析丰,郭龙彪,曾大力,钱前,马伯军.  中国水稻科学. 2012(05)
[9]高效液相色谱-串联质谱法定量检测稻谷中的稻曲病菌毒素A和D[J]. 祭芳,曹欢,徐剑宏,殷宪超,史建荣.  中国水稻科学. 2012(02)
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博士论文
[1]稻曲病菌侵染特性及产孢相关基因UvPRO1的功能分析[D]. 吕博.华中农业大学 2018
[2]稻曲病菌接种技术、群体遗传结构及致病力分化研究[D]. 贾切.华中农业大学 2014
[3]希金斯刺盘孢致病缺陷型突变体的筛选及其T-DNA插入基因的功能分析[D]. 刘丽萍.华中农业大学 2013

硕士论文
[1]玉米弯孢霉叶斑病菌Clk1基因的克隆与功能分析[D]. 周斐红.上海交通大学 2010



本文编号:3598066

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