甘蓝黑腐病菌Xanthomonas campestris pv. campestris topoIB基因的克隆及功能分析

发布时间：2022-02-17 22:57

　　野油菜黄单胞菌野菜致病变种（Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc）是严重威胁十字花科植物的重要病原真菌之一,可造成全世界范围内农业的严重减产。DNA拓扑异构酶是通过调节DNA的拓扑结构进而影响DNA复制、重组和转录过程。目前尚未见文献报道有关病原细菌中拓扑异构酶功能研究。为分析拓扑异构酶是否影响野油菜黄单胞菌野菜致病变种的致病性,本实验以Xcc 8004中Xcc₀034基因,预测编码的TopoIB蛋白作为研究对象,通过对TopoIB蛋白的理化性质进行初步的生物信息学分析,表明TopoIB蛋白含有核定位信号和信号肽。在农杆菌介导烟草叶片中瞬时表达,发现p1305-GFPTopoIB融合蛋白定位于烟草叶片的细胞核上。构建topoIB基因的原核表达载体,纯化的TopoIB重组蛋白反应15 min可以完全解旋超螺旋DNA,表明TopoIB蛋白具有拓扑异构酶活性。将topoIB基因突变后得到突变体ATopoIB,表型检测结果显示,ΔTopoIB菌株与野生型Xcc 8004在植物体内和培养基中的生长状况无明显差异,且胞外多糖产量基本... 

【文章来源】：中国植物病理学会2019年学术年会论文集中国植物病理学会会议论文集

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本文编号：3630258