冠突曲霉preA基因的功能分析

发布时间：2022-12-25 10:22

　　冠突曲霉（Aspergillus cristatus）能获得纯的无性或有性孢子,是研究曲霉有性产孢的优选材料。前期研究分析了冠突曲霉的野生型菌株和MAT基因敲除菌株的转录组数据,结果表明信息素受体基因（preA和preB）与交配型基因（MAT1-1和MAT1-2）可能存在调控关系。本研究利用基因敲除技术研究信息素受体基因preA的功能,结果显示preA基因参与了冠突曲霉的有性发育,是闭囊壳、子囊和子囊孢子正常发育所必需;且在子囊和子囊孢子形成阶段,preA基因对MAT1-1基因在表达水平上是正调控关系;而在营养生长和闭囊壳形成阶段,preA基因对MAT1-1和MAT1-2基因均是负调控作用。本研究结果表明preA基因在冠突曲霉有性发育中的功能,对阐释MAT基因对有性发育的调控功能具有重要意义。 

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 结果与分析
    1.1 Δpre A突变体的筛选
    1.2 pre A基因敲除菌株的形态学观察
    1.3 pre A基因敲除株的外源基因拷贝数检测
        1.3.1 引物特异性检测
        1.3.2 标准曲线的绘制
        1.3.3 pre A基因敲除株中实时荧光的检测
        1.3.4 pre A基因的表达
2 讨论
3 材料与方法
    3.1 菌株
    3.2 试剂和引物
    3.3 培养基
    3.4 pre A基因序列的分析和引物信息
    3.5 重组质粒pre A-L-p DHt/sk-hyg-pre A-R的构建
    3.6 重组质粒pre A-L-p DHt/sk-hyg-pre A-R转化根癌农杆菌的验证
    3.7 Δpre A突变株的筛选
    3.8 Δpre A突变株的表型以及显微结构观察
    3.9 冠突曲霉不同生长阶段pre A基因的表达量分析
    3.1 0 Δpre A突变株的HYG基因的拷贝数分析
作者贡献


【参考文献】：
期刊论文
[1]冠突散囊菌不同生长阶段MAT基因的表达量变化[J]. 葛永怡,吴石平,谭玉梅,刘永翔,刘作易.  西南农业学报. 2015(06)
[2]一种新颖简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法的建立[J]. 张驰宇,徐顺高,黄新祥.  生物化学与生物物理进展. 2005(09)



本文编号：3726430