PARP2突变恢复parg1突变体对基因毒剂敏感表型的机理研究

发布时间：2023-04-22 10:54

　　蛋白质多聚ADP核糖化是一种翻译后修饰方式,拟南芥中有3个编码多聚ADP核糖化聚合酶的基因(PARP1,PARP2和PARP3)和两个编码多聚ADP核糖水解酶的基因(PARG1和PARG2),其中PARG1突变体parg1-4对基因毒剂极其敏感,为了了解PARP家族成员PARP2基因与parg1突变体表型的关系,本研究将PARP2突变体parp2-3与parg1-4杂交获得了parp2-3parg1-4双突变体,发现PARP2突变部分恢复了parg1-4对双链断裂基因毒剂zeocin和单链断裂基因毒剂MMS敏感的表型.Western blot结果显示:在zeocin和MMS处理下,parp2-3parg1-4中的PAR信号强度与parg1-4中的相比大大降低.实时荧光定量PCR结果显示:在zeocin和MMS处理下,parg1-4中响应DNA损伤的基因在胁迫初期被显著诱导,胁迫后期与细胞死亡相关的基因表达量明显高于其他基因型植物,但PARP2突变后,parp2-3parg1-4中PAR水平和损伤及死亡基因的表达量均降低,从而部分恢复了parg1-4的敏感表型.

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 植物材料与生长条件
    1.2 方法
        1.2.1 植物总蛋白的提取
        1.2.2 Western blot
        1.2.3 植物杂交
        1.2.4 双突变体的鉴定
        1.2.5 叶绿素含量测定
        1.2.6 实时荧光定量PCR
2 结果与分析
    2.1 双突变体p2g1在zeocin和MMS处理下的表型分析
    2.2 parp2-3和parg1-4单/双突变体中PAR的水平分析
    2.3 zeocin和MMS处理下单/双突变体中DNA损伤与死亡响应基因的表达水平比较
3 讨论



本文编号：3797496