黄芪甲苷调节miR-21基因抑制肾癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的机制探讨

发布时间：2023-06-03 13:58

　　目的:探讨黄芪甲苷对肾癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:用终浓度为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L的黄芪甲苷处理肾癌细胞A498作为不同浓度黄芪甲苷处理组,正常培养的细胞作为对照(NC)组;将anti-miR-con、anti-miR-21转染至细胞A498中,记为anti-miR-con组、anti-miR-21组;将miR-con、miR-21转染至细胞A498中再用80μmol/L黄芪甲苷处理作为HSJG+miR-con组、HSJG+miR-21组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;蛋白质印迹(Western Blot)检测裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-21表达水平。结果:与对照组相比,不同浓度黄芪甲苷处理组肾癌细胞A498中细胞存活率显著降低,Cyclin D1表达水平显著降低,Cleaved-caspase-3表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,小鼠肿块...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 实验方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞处理与分组
        1.2.3 MTT法检测细胞存活率
        1.2.4 Western Blot检测Cleaved-caspase-3、Cyclin D1蛋白表达水平
        1.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡
        1.2.6 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-21表达水平
        1.2.7 验证黄芪甲苷和miR-21对小鼠肿瘤大小的影响
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 不同浓度的黄芪甲苷对肾癌A498细胞活力的影响
    2.2 不同浓度的黄芪甲苷对肾癌细胞A498凋亡的影响
    2.3 不同浓度的黄芪甲苷对miR-21表达水平的影响
    2.4 miR-21低表达对肾癌细胞A498增殖和凋亡的影响
    2.5 miR-21高表达对黄芪甲苷抑制肾癌细胞A498增殖和促进凋亡的影响
    2.6 小鼠体内实验验证
3 讨论



本文编号：3829468