水稻纹枯病抗性相关基因OsSBR1的功能研究

发布时间：2024-12-21 20:43

　　水稻纹枯病是世界范围内水稻最严重的病害之一,严重影响水稻生产。水稻纹枯病抗性属于数量遗传性状,且易受环境影响,迄今为止还没有发现高抗或免疫的水稻材料。我们实验室前期人员通过对水稻纹枯病相对抗病品种YSBR1与感病品种Lemont接种纹枯病菌进行芯片分析,筛选出109个差异表达基因(包括类受体激酶以及转录因子等),然后以水稻品种泰粳394为受体,创制一系列相应的RNAi转基因系材料,经过大田纹枯病接种鉴定,筛选获得水稻纹枯病抗性相关基因OsSBR1本研究包括创制纹枯病抗性相关基因OsSBR1的转基因株系并进行水稻离体叶片纹枯病接种鉴定、该基因编码蛋白的亚细胞定位、该基因的组织特异性表达以及比较转录组分析等内容。主要研究结果为:(1)创制纹枯病抗性相关基因OsSSBR1基因RNAi转基因株系、过表达转基因株系、基因敲除株系,进行离体叶片纹枯病菌接种抗性鉴定。通过对接种样品的病斑扫描来计算相对病斑面积,利用qPCR方法检测纹枯病菌相对含量,从而对水稻发病程度进行定量分析。与对照比较,OsSBR1-RNAi株系、OsSBR1基因敲除水稻株系,均对水稻纹枯病表现显著抗病。而OsSBR1过表达株系比...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１植物免疫反应原理图??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｉｍｍｕｎｅ?ｒｅｓｐｏｎｓｅ??

图１植物免疫反应原理图??Ｆｉｇｕｒｅ?１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｉｍｍｕｎｅ?ｒｅｓｐｏｎｓｅ??如图１所示ｔｌＧ３］，植物免疫反应过程主要包括：Ａ：由ＰＲＲｓ识别病原物的ＰＡＭＰｓ，??激发植物产生ＰＴＩ；?Ｂ：病原物进化出能够抑制植物ＰＴＩ的....

图２．５?份ｉ７－ＲＮＡｉ株系纹枯病接种样品的病斑扫描??Ｆｉｇ．?２．?５?Ｄ?ｉ?ｇ?ｉ?ａ?Ｉ?

注２：數值表示平均值士标准差。三次重复。??注３：?ＲＮＡｉ株系和对应的转基因受体材料进行成对ｔ检验，星号表示显著性差异（＊＊Ｐ＜?０．０１）。??图２．?２?ＲＮＡｉ株系中伽基因相对表达量??Ｆｉｇ．?２．２?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＯｓＳＢＲＩ?ｇｅｎｅ....

图２．８?基因过表达株系纹枯病接种样品的病斑扫描??

面积接近叶片面积的一半；而ＱＨＹ１３－４、ＱＨＹ１３－８、ＱＨＹ１３－１２离体叶片上面病斑蔓??延面积要少于转基因受体材料徐稻３号，表明Ｏｄ扮？／基因过表达转基因株系具有感??病表型。如图２．８Ｂ，?ＱＨＹ１６－２、ＱＨＹ１６－７、ＱＨＹ１６－１１离体叶片上面病斑蔓延面积要??少....

图３．?３?ＰＣＲ检测??

利用带有酶切位点的引物克隆扣？／基因的ＣＤＳ区域，通过Ｓａｌ?Ｉ和Ｓａｃ?１酶??切连接到ＰＸＧＪ７０线性载体中，形成用于探宄扣？／基因表达位置的亚细胞定位载??体ＰＱＨＹ１８?（图３．２）。经过ＰＣＲ凝胶电泳检测和测序都验证ｐＱＨＹ１８载体构建成功??（图?３．３）。??——３....

本文编号：4018879