星斑川鲽MHC Ⅱ恒定链Ii基因的克隆和表达特性
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【摘要】:为了研究星斑川鲽MHCⅡ类分子的作用及调控机制,实验通过SMART-RACE技术克隆得到了星斑川鲽MHCⅡ恒定链(MHCⅡIi)的全长cDNA序列,其长度为1766 bp,包含135 bp的5′非编码区、837 bp的开放阅读框和794 bp的3′非编码区。该基因共编码279个氨基酸。理论分子量为30.848 ku,等电点为6.89。与已知物种MHCⅡIi进行同源性比对,结果与狼鲈、紫红笛鲷和鳜关系较近,同源性均为79%。利用quantitative realtime PCR(qRT-PCR)技术检测了MHCⅡIi在星斑川鲽不同组织中的表达,以及爱德华氏菌感染前后对该基因在不同组织中表达水平的影响,结果显示:在脾脏、头肾、肝脏、后肠、性腺、心脏、血液、鳃和肌肉组织中,MHCⅡIi mRNA均有表达,但在表达量上有明显差异,脾脏和头肾组织相对表达水平较高,鳃、血液、肌肉、心脏和性腺中的表达水平较低。病原感染后,免疫相关组织脾脏和头肾的表达水平升高最明显,肝脏和后肠的表达水平也略有升高,但变化不明显。本研究可为星斑川鲽MHCⅡ类分子的作用机理提供理论依据,同时为海水养殖鱼类的抗病遗传育种工作提供研究基础。
【作者单位】: 国家海洋局第一海洋研究所;大连海洋大学;山东大学海洋学院;
【关键词】: 星斑川鲽 MHC Ⅱ Ii cDNA克隆 序列分析 表达特性
【基金】:国家“八六三”高技术研究发展计划(2012AA10413,2012AA10408) 国家海洋公益性行业科研专项(201405010)~~
【分类号】:S917.4
【正文快照】: 主要组织相容性复合体(major histocompati-bility complex,MHC)是染色体上一系列紧密连锁的基因位点所组成的具有高度多态性的复合遗传系统或区域[1 2],是一个与免疫功能密切相关的基因家族[3]。MHCⅡ类分子主要是递呈外源性抗原,其多态结合区约可容纳10~30个氨基酸残基的肽
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