水稻转基因系CX8621中Xa21的整合和表达

发布时间：2017-06-24 21:05

  本文关键词：水稻转基因系CX8621中Xa21的整合和表达，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：农杆菌介导的转基因技术在植物中已被广泛应用,而目的基因能否发挥功能受到多种因素的影响。前期,通过农杆菌介导的转化,实验室创制了无选择标记、无载体骨架残留的水稻转Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已稳定遗传16代,依然保持着对水稻白叶枯病的优良抗性。在此基础上,本研究对外源基因Xa21在CX8621中的整合和表达情况进行了分析。首先,通过在转化载体p BXa21的左右边界与Xa21基因序列设计嵌套引物,确定Xa21被完整地整合到CX8621中。随后,利用改良的Tail-PCR方法体外克隆了整合位点的边界序列,明确了Xa21被整合在CX8621的2号染色体上。然后,通过RT-PCR分析了Xa21在CX8621中不同时期和不同组织的表达情况,结果表明Xa21在CX8621中能稳定表达,其表达量的变化与之前报道的抗病性反应吻合。此外,还制备了天然XA21蛋白的抗体,对CX8621不同时期、不同组织中XA21蛋白的表达量进行了检测,结果发现在种子中检测不到XA21蛋白。由此,通过对外源基因Xa21的整合和表达分析,为CX8621的转基因生物安全评价提供了部分科学依据。
【作者单位】： 中国科学院遗传与发育生物学研究所;江汉大学系统生物学研究院;河北农业大学生命科学学院;
【关键词】： 转基因水稻 Xa 抗白叶枯病 T-DNA整合 表达分析
【基金】：转基因生物新品种培育重大专项(No.2014ZX08001-002) 国家自然科学基金(No.31300999) 江汉大学科研启动项目(No.3003-06000043)资助~~
【分类号】：S511;Q943.2
【正文快照】： Received:December 24,2015;Accepted:January 28,2016Supported by:National Transgenic Major Program of China(No.2014ZX08001-002),National Natural Science Foundation of China(No.31300999),Internal Grant of Jianhan University(No.3003-06000043).Corresponding a

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本文编号：479491