大蒜叶凝集素基因ASAL的克隆与表达载体的构建

发布时间：2017-06-26 08:12

  本文关键词：大蒜叶凝集素基因ASAL的克隆与表达载体的构建，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：大蒜叶凝集素基因(Allium sativum leaf agglutinin,ASAL)是一种高活性的凝集素基因,且具显著的抗虫性。克隆大蒜ASAL基因将为其在转基因作物中抗虫特性研究奠定基础。本文以GenBank公布的ASAL基因序列设计特异引物,采用RT-PCR法从当地大蒜品种二水早和新都软叶的幼苗中克隆ASAL基因。结果表明,克隆的两个ASAL基因与已知基因的碱基序列相似性分别为98.7%和98.9%,氨基酸序列相似性为98.3%。将其亚克隆至表达载体中,经菌落PCR和酶切鉴定,成功构建了重组质粒。将该载体导入农杆菌EHA5a进行保存。
【作者单位】： 四川省农业科学院植物保护研究所 农业部西南作物有害生物综合治理重点实验室;
【关键词】： ASAL基因 刺吸式害虫 基因克隆 表达载体 构建
【基金】：国家科技支撑计划西南稻区水稻重大病虫防控技术研究与集成示范(2012BAD19B03-09) 四川省财政基因工程优秀论文基金项目(2011LWJJ-005)
【分类号】：Q943.2
【正文快照】： 植物凝集素是来源于植物的一类能凝集细胞和沉淀单糖或多糖复合物的非免疫来源的非酶蛋白质。其研究始1888年,距今已有120多年的历史。1982年Hoffman等[1]克隆出了第一个凝集素基因为菜豆凝集素基因(PAa),目前已经分离出多种如豌豆凝集素(Pea leCtin,PL)、雪花莲凝集素(Galan-

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张建林,邬开朗,张雪,朱应,李雁,赵伟光,吴建国;siRNA表达载体的构建及其表达[J];中国病毒学;2004年05期

2 刘军,郭颖,薛采芳,黄豫晓,李英辉,丁劲,宫卫东,赵亚;哺乳动物细胞siRNA表达载体的构建及鉴定[J];第四军医大学学报;2003年24期

3 尹姝晗;吴雄文;杨敬宁;翁秀芳;梁智辉;韩军艳;黄亚飞;;表达载体sHLA-A2-IgG1-Fc的构建与鉴定[J];山西医科大学学报;2006年07期

4 周琦;金科华;罗德生;王彪;程新潮;王梅娟;段海瑞;;唾液富组蛋白5表达载体的构建[J];咸宁学院学报(医学版);2008年03期

5 刘明坤;刘昌财;许志茹;魏志刚;阎秀峰;刘关君;;一种快速构建35S组成型植物双价表达载体的方法[J];生物技术通报;2009年02期

6 李国才,孙怀昌,朱秋菊,张泉,居杏珠,陈刚,薛方明,于可响;三种乳腺特异表达载体表达特性的比较[J];中国生物工程杂志;2004年12期

7 杨桂香,彭险峰,曾振灵,陈杖榴;雌二醇依赖性的细胞表达载体的研究[J];中国农业科学;2005年05期

8 吴琼;张永亮;赵志辉;刘宇鹏;周立光;任晓慧;侯锋;章倩倩;吕铁钢;郝林琳;刘松财;;生长抑素基因靶向siRNA表达载体的构建及对生长抑素基因表达的抑制作用[J];中国兽医学报;2008年03期

9 张功员;赵国强;尹磊;张钦宪;;核干细胞因子基因siRNA表达载体的构建及鉴定[J];南方医科大学学报;2008年03期

10 杨新宇;张雷;郑花;康劲松;李洪岩;房学东;;钙转运蛋白基因siRNA表达载体的构建及鉴定[J];中国免疫学杂志;2008年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 徐琳;梁秀龄;徐评议;谢秋幼;汤其强;陈曦;王尚武;朱雅南;;肝脏特异性表达载体kbpala-ALB-ATP7B的构建及表达[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年

2 郭国宁;;pIRES2-EGFP/cbfa1真核双表达载体的构建及鉴定[A];第十一次全国急诊医学学术会议暨中华医学会急诊医学分会成立二十周年庆典论文汇编[C];2006年

3 辛静;兰丽珍;王明烨;;人过氧化物酶体增殖物激活受体γ-胰高血糖素样肽-1表达载体的构建[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年

4 张瑞军;田志刚;魏海明;孙lm;冯进波;赵跃然;张捷;;重组人白细胞介素-18表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达[A];第七届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2001年

5 向伟;何小解;马燕琳;易著文;郑维;曹艳;赵水平;马志超;吴明;符生苗;马建林;王洁;康红;;维生素D受体特异性siRNA表达载体的构建[A];第11届全国脂质与脂蛋白学术会议论文汇编[C];2012年

6 刘晓艳;方红;羊正纲;张好;阮黎明;蒋筱凌;;HPSE基因siRNA表达载体的构建及其沉寂作用[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年

7 马慧;赵开军;徐正进;;含芥菜几丁质酶基因的双元表达载体的构建[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年

8 时成波;吕安国;杨立泉;吴文芳;;一种新型原核生物表达载体的构建[A];2005热带亚热带微生物资源的遗传多样性与基因发掘利用研讨会论文集[C];2005年

9 赵大鹏;刘丹;戚凤春;;乙肝病毒DNA疫苗双表达载体的构建[A];2005全国第二届核酸疫苗研讨会论文集[C];2005年

10 雷宇;倪艳;王蜀强;周智;陈压西;任红;;HBV-S基因四环素调控双表达载体的构建及其调控表达研究[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年

中国博士学位论文全文数据库 前9条

1 史红艳;柯萨奇病毒B4单、双siRNA表达载体的构建及其抗病毒作用研究[D];吉林大学;2006年

2 张艳;HBsAg真核表达载体的构建及在CHO细胞高效表达的研究[D];吉林大学;2008年

3 姚旭东;人DAF、CD59基因特异表达载体的构建及其在猪血管内皮细胞表达的研究[D];天津医科大学;2002年

4 丁一;tPA乳腺特异性表达载体的构建及其瞬时表达[D];郑州大学;2003年

5 蒋永祥;Cre/LoxP增强特异性启动子诱导的自杀基因抑制晶状体上皮细胞增殖的实验研究[D];复旦大学;2008年

6 高波;表达人组织激肽释放酶鸡输卵管暂态生物反应器的研究[D];扬州大学;2005年

7 何红伟;靶向NRas和c-Myc的shRNA表达载体的构建及其抗肿瘤活性研究[D];中国协和医科大学;2005年

8 刘中华;不同茎部长度shRNA对模型小鼠EGFP基因表达干扰的研究[D];西北农林科技大学;2011年

9 薛永常;杨树木质素合成酶PAL基因的克隆、鉴定及其表达载体的构建[D];中国林业科学研究院;2001年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 高丁梅;内含子介导的TBSV病毒表达载体的研究[D];宁夏大学;2015年

2 范超;小麦抗赤霉病基因表达载体的构建及鉴定[D];华中农业大学;2015年

3 叶博;利用柞蚕核型多角体病毒表达载体系统表达人生长激素的研究[D];大连理工大学;2015年

4 盛婷;COX-2过表达载体的构建及其在HSCs中的表达[D];南华大学;2015年

5 杨阳;GnRH类似物基因串联表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达[D];济南大学;2015年

6 杨海洋;植物抗病抗逆相关基因表达载体的构建[D];华中农业大学;2013年

7 徐雷;IL-7直核表达载体的构建及稳定表达[D];西北民族大学;2016年

8 孙丽;pESP15b/pARA-SP6表达载体的构建及应用研究[D];大连理工大学;2005年

9 郑艳玲;人胰岛素基因乳腺特异性表达载体的构建[D];西北农林科技大学;2006年

10 魏魏;糖多孢红霉菌表达载体的研究[D];安徽大学;2007年

  本文关键词：大蒜叶凝集素基因ASAL的克隆与表达载体的构建，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：485426