桂花组织基因表达中荧光定量PCR内参基因的筛选

发布时间：2017-07-03 21:14

  本文关键词：桂花组织基因表达中荧光定量PCR内参基因的筛选

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【摘要】：为了筛选桂花Osmanthus fragrans不同组织基因表达分析中适合的内参基因,以桂花‘堰虹桂’O.fragrans‘YanhongGui’花蕾、盛开花序、嫩叶、成熟叶和1年生茎等5个不同组织为材料,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测7个候选内参基因的表达水平,并利用geNorm,NormFinder和BestKeeper软件对各候选内参基因的表达稳定性进行评价,最后利用桂花不同组织中OfCRTISO1基因相对表达水平验证筛选的内参基因的可靠性。结果表明:综合3个软件的评价排序,确定不同组织中最佳内参基因为OfRAN1和OfUBC2,而Of18S是最差内参基因。OfCRTISO1基因相对表达水平分析证实,不同组织中qRT-PCR分析使用OfRAN1和OfUBC2等2个表达最稳定的基因组合,即可获得更为精确的基因表达结果。旨在为桂花组织间重要基因的定量表达分析提供科学依据。
【作者单位】： 浙江农林大学风景园林与建筑学院;浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地;
【关键词】： 植物学 桂花 内参基因 geNorm NormFinder BestKeeper
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31501790,31170656) 浙江省自然科学基金资助项目(LQ15C160004) 浙江农林大学科研发展基金人才启动项目(2014FR072)
【分类号】：S685.13;Q943.2
【正文快照】： 实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time fluorescence polymerase chain reaction,q RT-PCR)因具有灵敏度高、特异性强、精准性高、检测范围广等优点[1],已被广泛应用于植物基因表达的相关研究中。利用q RT-PCR分析基因相对定量表达时,为了消除不同组织细胞间初

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