野生毛葡萄芪合成酶基因双向启动子活性分析

发布时间：2017-07-16 10:20

  本文关键词：野生毛葡萄芪合成酶基因双向启动子活性分析

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【摘要】：【目的】研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’(Vitis quinquangularis‘Danfeng-2’)芪合成酶(stilbene synthase)基因双向启动子的启动活性与差异。【方法】通过染色体步移技术克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因双向启动子,并与Uid A基因(β-葡萄糖苷酶基因,GUS)融合,利用真空渗透法在葡萄叶片中瞬时表达,组织化学染色和GUS蛋白定量法分别检测白粉菌接种、温度处理、茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸处理对双向启动子活性的影响。以毛葡萄‘丹凤-2’和欧洲葡萄‘赤霞珠’不同成熟时期果实的c DNA为模板,通过荧光实时定量PCR的方法分析Vq STS12/Vv STS31和Vq STS33/Vv STS32的表达情况。【结果】Pvq DSTS12受到白粉菌、茉莉酸甲酯、高温和低温的诱导后,启动活性增强,对水杨酸和脱落酸处理不敏感;Pvq DSTS33在茉莉酸甲酯处理下启动活性增强,在高温和低温的处理下启动活性降低,对水杨酸、脱落酸和白粉病处理不敏感。荧光实时定量PCR结果显示,在果实发育的6个时期中,‘丹凤-2’Vq STS12和Vq STS33的表达量均高于‘赤霞珠’Vv STS31和Vv STS32。4个基因的基本表达趋势为:浆果转色期之前持续增长,转色后期下降,浆果半熟期达到最高峰,浆果成熟期表达降低。其中毛葡萄‘丹凤-2’Vq STS12的表达量在转色后期并未降低且增加到上一时期的2.3倍;欧洲葡萄Vv STS32基因在成熟期表达量升高为前一时期的1.42倍。【结论】双向启动子活性的研究为利用植物天然双向启动子提供依据。
【作者单位】： 西北农林科技大学园艺学院;旱区作物逆境生物学国家重点试验室;农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点试验室;
【关键词】： 中国野生毛葡萄 芪合成酶 双向启动子 GUS
【基金】：国家自然科学基金(No.31372039)
【分类号】：S663.1
【正文快照】： 葡萄(Vitis L.)是多年生浆果类果树,有很高的经济学和生物学效益。芪合成酶(stilbene synthase)是苯丙氨酸途径中的催化合成白藜芦醇的关键酶[1]。白藜芦醇(resveratrol)作为植物中抵御真菌的植保素,对人体健康也有重要的医疗保健作用[2]。我国野生葡萄资源十分丰富,其中野生

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本文编号：548243