山羊痘病毒疫苗株ORF103基因的克

发布时间：2017-07-26 10:06

  本文关键词：山羊痘病毒疫苗株ORF103基因的克隆、序列分析及原核表达

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【摘要】：根据GenBank已登录的GTPV基因组序列,设计并合成1对特异性引物,以GTPV疫苗株基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF103基因片段并进行序列分析,再将该基因片段亚克隆于原核表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-ORF103,经鉴定正确后转化BL21感受态细胞进行诱导表达,并进行SDSPAGE和Western blot检测。成功克隆GTPV疫苗株ORF103基因片段。重组菌经IPTG诱导后成功表达分子质量约为35ku的重组蛋白,该蛋白能与山羊痘阳性血清特异性结合,具有良好的反应原性。研究结果为GTPV的分子生物学特性研究提供资料,并为进一步研制GTPV抗体检测试剂盒奠定基础。
【作者单位】： 西北农林科技大学动物医学院;
【关键词】： 山羊痘病毒 ORF基因 基因克隆 序列分析 原核表达
【基金】：陕西省科技攻关(2015NY162) 西北农林科技大学试验示范站(基地)科技成果推广(TGZX2015-32)~~
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 山羊痘(Goatpox)是由山羊痘病毒(Goatpoxvirus,GTPV)引起山羊的一种高度接触性传染病,主要以发热、呼吸困难、流黏液性或脓性鼻液及在皮肤黏膜出现痘疹为特征,病死率较高,能造成巨大的经济损失,严重影响国际贸易和养羊业的发展[1-3]。世界动物卫生组织(OIE)将该病列为必须通报

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