贻贝粘蛋白Mgfp-5基因在烟草中的转化

发布时间：2017-07-27 02:23

  本文关键词：贻贝粘蛋白Mgfp-5基因在烟草中的转化

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【摘要】：贻贝(Mytilus galloprovincialis)足腺分泌的粘蛋白Mgfp-5,是一种粘合强度高、生物相容性好的生物粘合剂,可以广泛应用于医学、化学表面以及海洋工程等领域。天然获取Mgfp-5时易固化且含量低,难获得、成本高制约了其应用,所以更多学者尝试基因工程方法获得粘蛋白Mgfp-5,其中鲜见借助植物基因工程表达Mgfp-5的报道。本研究构建携带Mgfp-5基因的植物表达载体p RI101-Mgfp,以秦烟95烟草叶片为受体,通过根癌农杆菌LBA4404介导方法,遗传转化外植体,历经转染、抗性筛选及分子生物学鉴定,获得转基因烟草植株。研究表明正确构建的植物表达载体p RI101-Mgfp,可以在外植体预培养3 d,农杆菌菌液OD600=0.6,侵染10 min,共培养3 d,20 mg/L卡那霉素抗性筛选培养的条件下,携带外源Mgfp-5基因,顺利转化进入烟草小苗,经过PCR、RT-PCR检测目标基因Mgfp-5在转化小苗基因组中可以整合及表达,得到转Mgfp-5基因烟草植株,生根后移栽成活。本研究为粘合蛋白Mgfp-5的表达、提取纯化及功能等深入研究提供参考,也是优质粘合剂粘合蛋白材料获得的一条新途径。
【作者单位】： 西北大学生命科学学院/陕西省生物重点实验室/西部资源与现代生物技术省部共建教育部重点实验室;
【关键词】： 粘蛋白Mgfp- 根癌农杆菌 遗传转化 烟草
【基金】：国家自然科学基金(31270411,31572665) 陕西省科技厅社会发展攻关计划(2012K12-01-02) 陕西省教育厅专项资金(12JK0827);陕西省教育厅重点实验室项目(12JS105)共同资助
【分类号】：Q943.2
【正文快照】： Transformation of Mytilus galloprovincialis Foot Protein Type 5(Mgfp-5)Gene in TobaccoLv Yuwei Zhang Yujing Lv Yawei Wang Ruijie Yang Zeshang Wang Yingjuan*College of Life Science,Northwestern University/Shaanxi Provincial Key Laboratory of Biotechnology

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李楠楠;谭亮;王智平;王信超;廖智;;厚壳贻贝足丝黏附蛋白mfp-3重组表达及黏附功能分析[J];中国生物化学与分子生物学报;2011年09期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 廖智;李楠楠;王信超;孙敬敬;申望;范美华;石戈;;利用蛋白质组学手段鉴定新型贻贝足丝蛋白[J];中国生物化学与分子生物学报;2012年09期

2 潘齐冬;齐齐;鲍林飞;秦传利;何建瑜;范美华;廖智;;基于Illumina测序的厚壳贻贝足组织转录组研究[J];中国生物化学与分子生物学报;2015年08期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 倪克奉;基于仿生粘附材料的生物催化剂固定化技术及其应用研究[D];华东理工大学;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 廖智;鲁涛;李楠楠;徐田军;王日昕;石戈;;厚壳贻贝(Mytilus coruscus)足丝蛋白mcofp3和mcofp6的cDNA克隆及序列分析[J];海洋与湖沼;2010年05期

2 鲁涛;廖智;刘梅;叶茂;谭亮;王日昕;;厚壳贻贝低分子量足丝蛋白的初步鉴定(英文)[J];水生生物学报;2011年01期

3 李楠楠;石戈;杨宵旭;王智平;廖智;;厚壳贻贝Mytilus coruscus足丝盘及足丝的多巴分析(英文)[J];中国生物化学与分子生物学报;2011年02期

4 张友玉,谢青季,袁玉,姚守拙;溶菌酶在裸金电极和巯基乙酸或正十二硫烷基醇修饰金电极上的吸附[J];应用化学;2002年01期

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本文编号：579448