032基因缺失猪痘病毒载体的构建及鉴定

发布时间：2017-08-01 12:16

  本文关键词：032基因缺失猪痘病毒载体的构建及鉴定

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【摘要】：目的:构建毒力减弱的猪痘病毒载体。方法:以猪痘病毒野生毒株NT1501株为亲本毒株,通过同源重组方法,构建缺失032毒力基因的猪痘病毒SPV△032。检测SPV△032在不同种属来源细胞系中的培养滴度,并通过动物试验来检测其毒力。结果:猪痘病毒SPV△032株与野生NT1501株在PK15和ST等猪源细胞中的培养滴度差异不显著,均可达到5.0×106TCID50左右。猪痘病毒SPV△032株在Vero、MDBK等其他物种来源的细胞系中不能进行复制,连续传代2~3代以后,细胞培养物中检测不到猪痘病毒基因,与野生NT1501株培养结果一致。动物试验结果表明,用高浓度SPV△032接种实验猪,接种部位皮肤未出现任何症状,比野生NT1501株的毒力显著降低。接种SPV△032实验猪的细胞免疫和体液免疫反应水平均显著高于野生NT1501株(P0.05)。接种SPV△032的实验猪不会通过粪便等途径向环境中排毒。结论:本研究构建了032基因缺失猪痘病毒SPV△032,该病毒的毒力与野生NT1501株相比显著下降,可以作为弱毒猪痘病毒载体,用于兽用疫苗研发。
【作者单位】： 南京农业大学动物医学院;
【关键词】： 猪痘病毒 基因 载体
【基金】：江苏省农业科技自主创新资金项目(CX(15)1056;CX(16)1028)
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 猪痘病毒(Swinepox virus,SPV)是脊椎动物痘病毒亚科(Chordopoxvirinae)猪痘病毒属(Suipoxvirus)的唯一成员[1]。猪是SPV唯一的天然宿主,其他动物均不被SPV感染[2]。猪感染SPV后可出现猪痘症状,该病于1842年首次在欧洲报道,目前在全世界范围内流行。SPV在表皮角质形成细胞中增

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本文编号：604189