反义RNA干扰MSTN对牛肌肉卫星细胞脂肪生成相关基因的影响

发布时间：2017-08-09 04:05

  本文关键词：反义RNA干扰MSTN对牛肌肉卫星细胞脂肪生成相关基因的影响

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【摘要】：肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)超家族成员,在骨骼肌中高表达;敲除MSTN后,肌肉质量增加、脂肪含量变少,但抑制MSTN表达后,如何影响脂肪沉积,尚未研究清楚。为了探究抑制MSTN表达后对脂肪相关基因表达的影响,本研究利用反义RNA技术,成功构建了双向表达载体p MSTN-CMV-CAG-anti MSTN,并通过Western blot筛选出抑制效果最佳的MSTN的反义载体。利用最佳反义MSTN载体在牛(Bos taurus)肌肉卫星细胞中有效干扰MSTN表达后,检测了脂肪合成相关基因(脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN),乙酰Co A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-Co A desaturase-1,SCD-1))、脂肪酸氧化分解相关基因(肉毒碱棕榈酰转移酶IB(carnitine palmitoyltransferase 1b,CPT-IB),乙酰辅酶A氧化酶(acyl-Co A oxidase,ACOX1)和烯酰辅酶A水合酶(enoyl-Co A hydratase 1,ECHDC1))以及脂肪转运蛋白(fatty acid transport proteins,FATP)表达的变化。结果显示,在MSTN基因被干扰后,肌肉卫星细胞中脂肪酸合成相关基因表达量上调,脂肪氧化分解相关基因中ACOX1和CPT-1B表达量上调,而ECHDC1基因表达量下调,另外,FATP表达基本没有变化。MSTN功能缺失后,脂肪合成和脂肪氧化分解过程都得到了加强,所以MSTN敲除所导致的脂肪减少并不是由于抑制了脂肪合成,而是由于脂肪分解加强,为肌肉提供更多的能量。MSTN下调后,CPT-1B的表达上调最为显著,而CPT-1B是脂肪酸β氧化的关键基因,所以研究结果提示MSTN对于脂肪的影响主要是通过影响β氧化过程实现的。研究结果为MSTN下调所导致的脂肪含量下降提供了理论依据,为MSTN作用于脂肪沉积的机制做出了初步探讨。
【作者单位】： 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室;
【关键词】： 肌肉生长抑制素(MSTN) 反义RNA 牛肌肉卫星细胞 脂肪沉积
【基金】：国家科技重大专项(No.2015ZX08007-002)
【分类号】：S823
【正文快照】： 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN),也称生长分化因子8(growth/differentiation factor-8,GDF8),属于转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)超家族,是骨骼肌生长和发育的负调控因子,会抑制骨骼肌的生长和发育。Mc Pherron等(1997)首次制备了MSTN基因敲除小鼠(Mus

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本文编号：643404