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茶树CsSMT基因的克

发布时间:2017-08-09 09:35

  本文关键词:茶树CsSMT基因的克隆、原核表达及植物超表达载体构建


  更多相关文章: 茶树 Cs SMT 原核表达 超表达


【摘要】:为了发掘利用茶树(Camellia sinensis)富硒关键酶硒代半胱氨酸甲基转移酶(Selenocysteine methyltransferase,SMT)基因Cs SMT,基于宁州2号转录组测序结果,通过RACE克隆该基因的c DNA全长,并通过原核表达和蛋白质印迹(Western blotting)验证该基因,然后构建超表达载体,转化至根癌农杆菌。结果表明:该基因c DNA全长为1277 bp,开放阅读框(Open reading frame,ORF)为1 050 bp,与NCBI公布的茶树该基因ORF序列有8个点突变,且缺少GTCGTC序列。Cs SMT基因编码349个氨基酸,其氨基酸序列与毛果杨、野生大豆、黄芪的SMT以及川桑的同型半胱氨酸-S-甲基转移酶2(Homocysteine-S-methyltransferase 2,HMT2)的氨基酸序列有较高的相似性。目标蛋白分子量约38 k Da,为水溶性蛋白,与预测结果相符。成功构建Cs SMT基因的超表达载体,并获得携带Cs SMT的农杆菌菌株。
【作者单位】: 贵州省农业科学院茶叶研究所;
【关键词】茶树 Cs SMT 原核表达 超表达
【基金】:贵州省农业科学院研究生科研创新基金项目“茶树富硒作用关键酶基因CsSMT的克隆与超表达研究”[黔农科合(创新基金)2011006] 贵州省体改项目“现代高效农业园区茶叶栽培与加工技术集成示范”[黔科合Z字[2013]4008] 贵州省农业攻关项目“贵定鸟王茶种质资源的保护及开发利用”[黔科合NY字[2011]3046] 贵州省农业动植物育种专项“黔茶1号区域适应性高效栽培研究与示范”[黔农育专字(2012)022号],“贵定鸟王种扩繁和栽培技术集成与示范”[黔农育专字(2015)003]
【分类号】:S571.1
【正文快照】: 号区域适应性高效栽培研究与示范”[黔农育专字(2012)022号],“贵定鸟王种扩繁和栽培技术集成与示范”[黔农育专字(2015)003]硒是人体必需的微量元素,对人体具有抗氧化、抗克山病、抗节骨病、抗心脏病、抗甲状腺机能减退及抗癌等保健功能[1]。虽未证明硒是植物的必须营养元素,

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