三七几丁质酶基因PnCHI1的克隆及表达特性分析

发布时间：2017-08-10 20:22

  本文关键词：三七几丁质酶基因PnCHI1的克隆及表达特性分析

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【摘要】：几丁质酶(chitinase,EC3.2.1.14)广泛存在于多种生物体中,催化水解几丁质(chitin),在抗真菌防卫反应体系中具有重要作用,同时几丁质酶还调控植物的生长和发育,参与细胞的程序性死亡(programmed cell death,PCD)。该实验基于三七Panax notoginseng中编码几丁质酶的EST序列设计引物,采用快速扩增cDNA末端技术,克隆得到1个新的几丁质酶基因的全长cDNA序列,命名为PnCHI1。PnCHI1的cDNA全长为1 022 bp,含有822 bp的开放阅读框,26 bp 5'-非翻译区以及174bp的3'-非翻译区,编码具有273个氨基酸的蛋白质。该基因编码的蛋白属于糖苷水解酶19家族成员,进化树分析表明PnCHI1编码的氨基酸序列属于IV类几丁质酶。qRT-PCR分析结果显示,植物信号分子水杨酸、茉莉酸甲酯、H_2O_2和乙烯处理可均明显诱导三七根中PnCHI1的转录水平;三七叶片接种人参链格孢Altemaria panax后,PnCHI1的表达量迅速升高,呈波动上升趋势;外源茉莉酸甲酯预处理三七根部,PnCHI1的表达水平上升,接种茄腐镰刀菌Fusarium solani后,PnCHI1的转录水平急剧上升,接种后4 h达到最高转录水平;而无菌水预处理三七受茄腐镰刀菌侵染过程中,PnCHI1的表达量逐渐上升,至48h达到最大值。上述结果表明PnCHI1参与三七对根腐病菌以及黑斑病菌的防卫反应。
【作者单位】： 昆明理工大学生命科学与技术学院;
【关键词】： 三七 几丁质酶 基因克隆 茄腐镰刀菌 人参链格孢 防卫反应
【基金】：国家自然科学基金项目(81560610) 云南省应用基础研究计划项目(2013FA031,2014FA003)
【分类号】：S435.672
【正文快照】： 植物在生长发育过程中会遭受多种生物和非生物因子的胁迫,如干旱、寒冷、UV射线、创伤、病原物(真菌、细菌、病毒)侵染等,为此植物进化出一系列防御机制来抵御逆境胁迫,病程相关蛋白(pathogenesis-related protein,PR)的激活和积累是植物防御反应的重要组成部分[1]。植物表达

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本文编号：652502