牛eIF5基因原核表达与蛋白纯化

发布时间：2017-08-13 17:03

  本文关键词：牛eIF5基因原核表达与蛋白纯化

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【摘要】：研究应用PCR方法扩增牛e IF5基因编码序列,通过Eco RⅠ和SalⅠ酶切位点将其定向插入p GEX-4T-1载体,构建原核表达重组质粒p GEX-4T-1-e IF5,并转化大肠埃希菌BL21。酶切和测序鉴定正确后,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)大量诱导表达,利用GST-Sepharose 4B亲和珠纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定。结果表明,原核表达载体p GEX-4T-1-e IF5构建成功,Western Blot证实融合蛋白大量表达,纯化后获得GSTe IF5融合蛋白,为深入研究牛e IF5蛋白功能奠定基础。
【作者单位】： 东北农业大学黑龙江省高校农业生物功能基因重点实验室;
【关键词】： 牛 eIF 克隆 原核表达 纯化
【基金】：国家高技术研究发展计划(863)项目(2013AA102504-03)
【分类号】：S823;Q78
【正文快照】： Prokaryotic expression and protein purification of gene bovine e IF5/GAO Xuejun,ZANG Yanli,WEI Chengjie,LUO Chaochao(Agricultural Biological Functional GeneLaboratory of Heilongjiang Province,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)真核生物

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本文编号：668352