粪便中大肠癌特异性NDRG4基因甲基化水平的超高灵敏定量检测法

发布时间：2017-08-14 07:41

  本文关键词：粪便中大肠癌特异性NDRG4基因甲基化水平的超高灵敏定量检测法

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【摘要】：目的粪便中NDRG4基因的甲基化可作为一种无创检测大肠癌的标志物,但传统DNA甲基化检测方法因灵敏度低、特异性不高难以用于粪便样本的检测。文中旨在建立一种高灵敏、高特异的NDRG4基因甲基化定量检测方法(2-ΔCT法),并用于患者粪便DNA样本的检测。方法选择来自南京军区南京总医院的41例粪便样本,其中12例大肠癌、4例腺瘤、25例正常人样本。将核酸侵入反应与实时荧光PCR技术耦联,采用2-ΔCT法进行相对定量,建立高灵敏高特异的DNA甲基化检测方法,并用于41例粪便样本中NDRG4基因甲基化水平的检测。结果检测了6例大肠癌组织及4例FFPE样本中NDRG4基因甲基化水平,全部样本中均能测出NDRG4基因甲基化,甲基化水平范围为0.01%~6.09%。大肠癌、腺瘤患者及正常人中各有8例、4例、2例检测到甲基化信号,甲基化范围分别为0.06%(0~0.51%)、6.61%(0~23.06%)、6.30%(0~51.01%)。大肠癌、腺瘤患者中甲基化检出率(33.3%、50.0%)较正常人显著升高(4.0%),差异有统计学意义(P0.05)。结论 2-ΔCT法可用于粪便样本中NDRG4基因甲基化水平的准确测定,为大肠癌的无创检测提供了有力工具。
【作者单位】： 中国药科大学生命科学与技术学院;南京军区南京总医院药理科;
【关键词】： 大肠癌 NDRG基因 DNA甲基化 核酸侵入反应
【基金】：国家自然科学基金(21275161,21475151) 江苏省临床科技专项-新型诊疗技术攻关资助项目(BL2012061) 江苏省“六大人才高峰”项目(2015-WSN-085)
【分类号】：R735.34
【正文快照】： 0引言大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一[1]。据统计,早期大肠癌5年生存率达90%以上,中晚期常不足50%。然而超过60%的大肠癌患者被确诊时已处于中晚期[2-3]。因此,针对广泛人群尤其是高危人群的大肠癌早期筛查诊断具有非常重大的意义。目前,临床上大肠癌筛查主要依靠粪便隐血试验

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