草鱼钠磷协同转运载体Slc34a2基因的克隆及组织表达分析
发布时间:2017-08-18 05:17
本文关键词:草鱼钠磷协同转运载体Slc34a2基因的克隆及组织表达分析
【摘要】:为了揭示草鱼对磷的吸收机制,运用RT-PCR和快速扩增c DNA末端方法,从草鱼(Ctenopharyngodon idella)肠中克隆获得钠磷协同转运载体基因Slc34a2,该基因全长为2446 bp,包含了1938 bp的开放阅读框,47 bp的5′非编码区(Untranslated region,UTR)和461 bp的3′UTR,编码645个氨基酸。草鱼SLC34A2蛋白的分子式为C3215H5125N801O902S30,分子量大小为70.39 k D,等电点为5.68,总平均疏水指数为0.458。对草鱼SLC34A2蛋白结构和功能预测分析,发现SLC34A2蛋白有11个跨膜域,1个半胱氨酸富集区,且N-端在胞外而C-端在胞内,也在第二个细胞外环中发现4个N-糖基化位点。用邻接法构建系统进化树,发现草鱼Slc34a2基因与硬骨鱼类聚类为一支,且草鱼SLC34A2蛋白与鲤(Cyprinus carpio)和斑马鱼(Danio rerio)SLC34A2的相似性最高,分别为90.3%和87.0%。实验采用了实时荧光定量PCR对草鱼Slc34a2 m RNA进行组织表达分析,结果表明Slc34a2 m RNA在组织中广谱表达,且在肠中表达最高,其次是肝脏、鳃、肾脏、脾脏、皮肤、肌肉、脑和头肾。实验为以后研究提高鱼对磷的利用和减少磷的排放奠定分子基础。
【作者单位】: 华中农业大学水产学院淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心;中国水产科学研究院东海水产研究所农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室;
【关键词】: 草鱼 Slca 分子克隆 基因表达
【基金】:国家自然科学基金(31172421) 现代农业产业技术体系建设专项基金(CARS-46)资助~~
【分类号】:S917.4
【正文快照】: 磷是核酸(ATP和GTP)、中间代谢(如:蛋白质磷酸化、高能转运载体和血液缓冲)、细胞内信号通路、细胞增殖(DNA和RNA)、细胞膜的磷脂成分和骨骼结构所必须的一种矿物质[1]。目前在商业饲料中无机磷的添加量普遍较高,大约每吨饲料含有20—25 kg的Ca(H2PO4)2?H2O,且在投喂的饲料中,
本文编号:692846
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