基于双链特异性核酸酶信号扩增的纳米传感器检测microRNA

发布时间：2021-03-09 12:21

　　MicroRNA（miRNA）是一类内源性非编码小分子RNA,对基因的表达以及各种生命体活动有重要的调控作用。研究表明,人类的许多疾病包括癌症都与miRNA的异常表达有密切关系。MiRNA已经作为一种新的生物标志物用于癌症等重大疾病的早期诊断。但是,miRNA序列短,在体内含量低,且许多同源序列仅仅有1²个碱基的差别,相似程度很高,这就给miRNA的检测带来了挑战。所以,人们一直热衷于高灵敏的miRNA检测方法的研究。但是,在追求高灵敏度的同时,方法的简便、低成本,在方法的实际应用中同样重要。所以,如何建立简单、灵敏的miRNA检测方法,对于相关疾病的临床诊断,以及以miRNA为靶标分子的药物研究都具有重要意义。双链特异性核酸酶信号扩增（duplex-specific nuclease signal amplification,DSNSA）是一种由双链特异性核酸酶（duplex-specific nuclease,DSN）诱导的恒温核酸扩增技术。DSN能够特异性识别并降解RNA-DNA杂合双链中的DNA链,RNA链被释放,释放的RNA链可以继续参加下一轮的杂交-酶... 

【文章来源】：河北大学河北省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Northern印迹技术示意图

图 1.2 RT-PCR 法分析检测 miRNA 原理图R (Reverse transcription PCR，RT-PCR) 是 PCR 应用成 cDNA，然后以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增，通过检测 miRNA 的目的。2005 年，Raymond 等人[17]首次利用检测原理如图 1.2 所示，首先设计一条带有较长 DNA rimer) ，GSP 引物与 miRNA 部分杂交并经反转录延伸 cDNA；然后引入含有 LNA 修饰的第二条引物，以 cDNA BR Green Ⅰ进行实时荧光分析。该方法中引入 LNA 修度和选择性，但同时也增加了实验的费用。

图 1.2 RT-PCR 法分析检测 miRNA 原理图everse transcription PCR，RT-PCR) 是 PCRNA，然后以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增，通iRNA 的目的。2005 年，Raymond 等人[17]首次理如图 1.2 所示，首先设计一条带有较长 ，GSP 引物与 miRNA 部分杂交并经反转录；然后引入含有 LNA 修饰的第二条引物，以 creen Ⅰ进行实时荧光分析。该方法中引入 L选择性，但同时也增加了实验的费用。

【参考文献】：
期刊论文
[1]双链特异性核酸酶介导的高灵敏度microRNA分析[J]. 李晓利,王愈聪,张学晶,赵云颉,刘成辉,李正平.  化学学报. 2014(03)

硕士论文
[1]基于金属纳米材料构建高灵敏的电化学生物传感器的研究[D]. 伍永梅.西南大学 2014
[2]基于金属纳米发光材料的新型生物传感器研究[D]. 胡益辉.湖南大学 2013



本文编号：3072842