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基于G-四链体探针的蛋白质生物传感研究

发布时间:2021-11-07 10:04
  G-四链体是一种特殊的DNA二级结构,是由富含鸟嘌呤(G)的核酸通过四个Hoogsteen氢键结合形成G-四分体,进而发生π-π堆叠形成的特殊结构。某些蛋白质、金属离子及有机染料都可诱导G-四链体的形成,并与其结合成稳定的复合物。硫黄素T(Thioflavin-T,ThT)是一种具有高度特异性的G-四链体荧光探针,可嵌入G-四链体并发射较强荧光,为高灵敏度生物传感器的设计提供了新的思路。水溶性共轭聚合物具有很强的光吸收性能、高的荧光量子产率和良好的光稳定性,在化学/生物传感和荧光成像领域具有广阔的应用前景。蛋白质是生物体中含量最高,功能最重要的一类生物大分子,许多疾病的产生都与蛋白质的异常表达有关。因此,特定蛋白质的检测在生物、医学领域和临床研究中都具有非常重要的意义。本课题基于G-四链体探针ThT和具有高亮度的荧光共轭聚合物,设计了两种高灵敏度的光学生物传感策略,实现了对γ-干扰素和端粒酶活性的简便、快速检测。γ-干扰素(interferon-gamma,INF-γ)是一种重要的细胞因子蛋白,具有抗病毒、抗增殖、分化诱导和免疫调节特性。其核酸适配体为一段特殊的富G序列,在ThT存在时... 

【文章来源】:南京邮电大学江苏省

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

基于G-四链体探针的蛋白质生物传感研究


A)G-四分体的结构;B)G-四链体的混合型结构(左)、反平行结构(中)、平行结构(右);C)NMM的分子式(1)ThT(Thioflavin-T)

序列,结构变化,检测原理,课题组


图 1.2 基于 ThT 与 G-四链体结构变化对 Hg2+检测原理图,Wu 课题组构建了以一种灵敏的、扩增的和无标记的 RNase H 活性测定 所示,RNA 酶 H 释放 DNA,降解 RNA/DNA 杂交双链体的 RNA 链,触发并产生大量的富含 G 的序列。最后,形成 G-四链体/ThT 复合物结构,导从而实现对 RHase H 活性的测定。

示意图,切口,原理,示意图


3图 1.3 基于 ThT 与切口酶实现检测 RNase H 活性的原理示意图(N-methylmesoporphyrin IX)(N-methylmesoporphyrin IX)是一种水溶性的、化学稳定的质的可商购的分子。同时,NMM(图 1.1 B)是血红素生物,因此是亚铁螯合酶的有效抑制剂。在此期间开发 NMM 13],Sen 及其同事分离了能够采用 G-四链体结构的 NMM 适和力(Kd= 0.5-1.0 mM)结合[14]。这些结果提供了第一个


本文编号:3481657

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