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单层还原氧化石墨烯电化学生物传感器检测人体血清中Tau-441蛋白

发布时间:2021-12-11 11:22
  目的阿尔茨海默病(AD)是一种最常见的神经退行性疾病。2010年,全球已有3600万AD患者,预计到2030年AD患者将达到6570万。Tau蛋白异常聚集形成的神经原纤维缠结是AD的主要病理特征,并且4R亚型的Tau-441蛋白的增加与认知功能下降有关,其可能作为AD早期诊断的生物标志物。本研究旨在构建一种基于单层还原氧化石墨烯电化学生物传感器高灵敏的检测人体血清中Tau-441蛋白,为AD的早期诊断提供技术支持。方法本研究利用1,3,6,8-芘四磺酸四钠盐(PTSA)将还原氧化石墨烯(rGO)剥离成导电性能更好的单层还原氧化石墨烯。带有羧基的单层还原氧化石墨烯修饰玻碳电极,在EDC/NHS的作用下固定带有氨基的抗体,Tau-441蛋白通过抗体特异性识别结合到玻碳电极上,利用循环伏安法(CV)技术对电化学生物传感器进行电化学表征,方波伏安法(SWV)研究抗体与Tau-441蛋白之间的相互作用,电位值定性,电流值定量。为了得到较好的检测结果,本研究对实验中复合材料的体积、抗体的孵育时间、抗体的体积、抗原抗体孵育时间4个条件进行了优化。在最优条件下,验证该方法的检出限、特异性、准确度和精密... 

【文章来源】:武汉科技大学湖北省

【文章页数】:60 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
前言
第1章 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验试剂和耗材
        1.1.2 实验仪器
    1.2 方法
        1.2.1 原理
        1.2.2 rGO/PTSA/Cu~(2+)复合材料的制备
        1.2.3 玻碳电极的修饰
        1.2.4 电化学生物传感器的构建
        1.2.5 电极的CV电化学方法表征
        1.2.6 人体血清样品的处理
        1.2.7 方法学性能指标
        1.2.8 溶液的配制
第2章 结果
    2.1 材料的表征
    2.2 电极的电化学性能
    2.3 电极修饰膜的稳定性
    2.4 检测条件的优化
        2.4.1 rGO/PTSA/Cu~(2+)复合材料的体积的优化
        2.4.2 抗体体积的优化
        2.4.3 抗体孵育时间的优化
        2.4.4 抗原抗体孵育时间的优化
    2.5 方法学验证
        2.5.1 SWV检测图
        2.5.2 线性和检出限
        2.5.3 方法的准确度和精密度
        2.5.4 方法的选择性和稳定性
    2.6 人体血清样品的检测
第3章 讨论
    3.1 材料的表征
    3.2 电极的电化学性能
    3.3 电极修饰膜的稳定性
    3.4 检测条件的优化
        3.4.1 rGO/PTSA/Cu~(2+)复合材料的体积的优化
        3.4.2 抗体体积的优化
        3.4.3 抗体孵育时间的优化
        3.4.4 抗原抗体孵育时间的优化
    3.5 方法学验证
        3.5.1 SWV检测图
        3.5.2 线性和检出限
        3.5.3 方法的准确度和精密度
        3.5.4 方法的选择性和稳定性
    3.6 人体血清样品的检测
第4章 结论与展望
参考文献
综述
    参考文献
致谢
附录1 攻读学位期间的研究成果
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目


【参考文献】:
期刊论文
[1]石墨的矿物学属性、功能化与石墨新材料的应用[J]. 孙红娟,侯波,彭同江.  矿产保护与利用. 2019(06)
[2]tau蛋白与阿尔茨海默病[J]. 王金春,刘慧影,曹云鹏.  中国组织工程研究. 2020(17)
[3]阿尔茨海默病中Tau蛋白与线粒体损伤[J]. 赵俊一,钟伟聪,邓云松,肖时锋.  生命科学研究. 2020(01)
[4]传感器新技术在生物医学中的应用[J]. 郭东睿.  科技风. 2020(01)
[5]国内外石墨烯前沿应用研究进展[J]. 江洪,王春晓.  新材料产业. 2019(11)
[6]活体电化学生物传感的研究进展[J]. 魏欢,吴菲,于萍,毛兰群.  分析化学. 2019(10)
[7]进行性核上性麻痹患者认知障碍研究进展[J]. 李姝颖,欧汝威,商慧芳.  中国神经精神疾病杂志. 2019(09)
[8]皮质基底节变性诊断1例报道[J]. 杨语嫣,朱遂强,黄珊珊.  神经损伤与功能重建. 2019(08)
[9]石墨烯的电化学生物传感器研究进展[J]. 马依拉·克然木,李首城,胡天浩,崔静洁.  材料导报. 2019(S1)
[10]对进行性核上性麻痹新诊断标准的思考:附2例病例报告[J]. 孙澄玥,彭林柳,杜夏,刘艺鸣.  南京医科大学学报(自然科学版). 2019(04)



本文编号:3534588

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