多重信号放大的电化学生物传感器检测人体血清tau-441蛋白研究

发布时间：2024-02-18 00:45

　　目的Tau蛋白是一类微管相关蛋白,可促进微管蛋白聚合,参与神经细胞骨架的构成。Tau蛋白有六种异构体,它们结构上的差异主要在于氨基末端区域(N末端)与羧基末端区域(C末端)的不同。仅含N末端的tau蛋白就能引起认知功能的减退。认知功能障碍是痴呆的典型临床表现,痴呆症作为一种进行综合征严重影响着患者的生活能力。Tau蛋白亚型中最长的异构体tau-441蛋白含有两个N末端片段,tau-441蛋白水平与认知功能障碍密切相关,其有望评估认知障碍,从而成为痴呆早期诊断的生物标志物。Tau-441蛋白可存在脑脊液与血液中。相比于脑脊液,血样取材更为方便、低创。但由于血脑屏障,tau-441蛋白在血液中含量少,目前常用的酶联免疫吸附试验尚无法满足检测要求。电化学生物传感器在提高灵敏度方面极具优势,且通过纳米材料的应用,能进一步提高检测的灵敏度。本研究旨在构建出基于碳纳米材料与金纳米粒子的多重信号放大的电化学生物传感器对tau-441蛋白进行灵敏测定,并将构建的分析方法应用于正常人、轻度认知障碍患者、痴呆患者的实际血清样本中,为痴呆的早期诊断提供一种新的思路。方法本研究通过将合成的多壁碳纳米管-还原氧...

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摘要
ABSTRACT
前言
第1章 材料与方法
    1.1 实验试剂与仪器耗材
        1.1.1 实验试剂
        1.1.2 仪器耗材
    1.2 方法
        1.2.1 原理
        1.2.2 MWCNTs-rGO-CS复合物的合成
        1.2.3 Tau-441-AuNPs共轭体的合成
        1.2.4 纳米材料的电镜表征
        1.2.5 金电极的修饰
        1.2.6 特异性抗体的固定
        1.2.7 电化学分析测量
        1.2.8 实际血清样本的处理
        1.2.9 方法学验证
        1.2.10 溶液的配制
第2章 结果
    2.1 纳米材料的电镜表征
        2.1.1 AuNPs的电镜表征
        2.1.2 MWCNTs、rGO、MWCNTs-rGO的电镜表征
    2.2 电化学测量评估信号的放大和抗体的固定
    2.3 实验条件的优化
        2.3.1 MWCNTs-rGO-CS复合物体积的优化
        2.3.2 Tau-441 蛋白与AuNPs体积比的优化
        2.3.3 Tau-441-AuNPs共轭体与特异性抗体孵育时间的优化
    2.4 方法学验证
        2.4.1 DPV测定图及标准曲线
        2.4.2 方法检出限
        2.4.3 电化学生物传感器的特异性
        2.4.4 电化学生物传感器的准确度与精密度
        2.4.5 电化学生物传感器的稳定性
        2.4.6 电化学生物传感器的重现性
    2.5 人体血清样本的检测
第3章 讨论
    3.1 纳米材料的电镜表征
        3.1.1 AuNPs的电镜表征
        3.1.2 MWCNTs、rGO、MWCNTs-rGO的电镜表征
    3.2 电化学测量评估信号的放大和抗体的固定
    3.3 实验条件的优化
        3.3.1 MWCNTs-rGO-CS复合物体积的优化
        3.3.2 Tau-441 蛋白与AuNPs体积比的优化
        3.3.3 Tau-441-AuNPs共轭体与特异性抗体孵育时间的优化
    3.4 方法学验证
        3.4.1 DPV测定图及标准曲线
        3.4.2 方法检出限
        3.4.3 电化学生物传感器的特异性、准确度、精密度、稳定性、重现性
    3.5 人体血清样本的检测
第4章 结论与展望
参考文献
综述
    参考文献
致谢
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目



本文编号：3901601