毛细管电泳化学发光分析新方法建立及尿液样品中的应用研究

发布时间：2017-10-15 23:20

  本文关键词：毛细管电泳化学发光分析新方法建立及尿液样品中的应用研究

  更多相关文章： 毛细管电泳 化学发光 Ag(Ⅲ)络合物 Ni(Ⅳ)络合物 鲁米诺

【摘要】：化学发光(Chemiluminescence,CL)分析在我国自20世纪70年代末期发展起来,因其具有灵敏度高、成本低廉、操作简便、易实现自动化及快速检测等优点,近年来得到快速发展,不同的化学发光新体系的研发同样是卫生化学领域研究的热点之一。化学发光不需要外加光源,而是反应体系中的某些物质吸收了反应释放的化学能而被激发,由激发态回到基态过程中将能量以光辐射的形式释放,从而产生的化学发光,避免了环境光线的影响。但因化学发光分析法的选择性较差,限制了其应用,因此常将化学发光的检测手段与高效液相色谱、毛细管电泳等具有高选择性的技术联用。与高效液相色谱相比,毛细管电泳在分离效率、分析速度、消耗成本及样品用量等方面更具有优势。在前期的研究工作中发现,在碱性条件下Ag(Ⅲ)络合物与Ni(Ⅳ)络合物皆能与鲁米诺反应并产生稳定的化学发光信号。结合具有高效分离特点的毛细管电泳技术,分别建立了Ag(Ⅲ)络合物-鲁米诺化学发光新体系与Ni(Ⅳ)络合物-鲁米诺化学发光新体系联用毛细管电泳技术对尿液中物质的分离检测。该方法操作简单,不需要复杂的样品前处理步骤,所得结果准确可靠。第一部分、Ag(Ⅲ)化学发光-毛细管电泳检测叶酸目的:建立测定叶酸的毛细管电泳化学发光新方法。方法:在碱性条件下,Ag(Ⅲ)-鲁米诺化学发光新体系具有稳定的化学发光信号,叶酸能显著抑制Ag(Ⅲ)-鲁米诺化学发光新体系的信号强度,且发光强度与样品浓度在一定范围内呈现良好的线性关系。对实验的分离条件及发光条件进行优化,在优化的条件下确定叶酸的线性范围并绘制标准曲线,而后对片剂及尿液中的叶酸进行分离检测。结果:在优化的条件下测得叶酸的线性范围为5~150 mg/L,线性回归方程:△I=3.5051C+9.916,相关系数r=0.9953,最低检出限为2.31mg/L。对80 mg/L的叶酸连续进行11次平行测定,获得相对标准偏差为2.83%。对片剂及尿液中的叶酸进行分离检测,其加标回收率分别在81.30%~114.13%和81.98%~105.74%之间。结论:毛细管电泳化学发光法用于测定片剂及尿液中的叶酸,方法简便快捷、准确可靠。第二部分、Ni(Ⅳ)化学发光-毛细管电泳测定8-羟基脱氧鸟苷、高香草酸和5-羟基吲哚乙酸目的:建立测定8-羟基脱氧鸟苷、高香草酸和5-羟基吲哚乙酸的毛细管电泳化学发光新方法。方法:在碱性条件下,Ni(Ⅳ)络合物-鲁米诺化学发光新体系具有稳定的化学发光信号,8-羟基脱氧鸟苷、高香草酸和5-羟基吲哚乙酸能显著抑制Ni(Ⅳ)-鲁米诺化学发光新体系的信号强度,且发光强度与样品浓度在一定范围内呈现良好的线性关系。对实验的分离条件及发光条件进行优化,在优化的条件下确定叶酸的线性范围并绘制标准曲线,而后对尿液中的8-羟基脱氧鸟苷、高香草酸和5-羟基吲哚乙酸进行分离检测。结果:在优化的条件下测得8-羟基脱氧鸟苷的线性范围为0.2~10mg/L,线性回归方程△I=16.455C+14.413,相关系数r=0.9955,最低检出限为0.02 mg/L。对4 mg/L的8-羟基脱氧鸟苷连续进行7次平行测定,获得相对标准偏差为1.5%。对尿液中的8-羟基脱氧鸟苷进行分离检测,其加标回收率在94.73%~105.22%之间。在优化的条件下测得高香草酸的线性范围为0.08~5 mg/L,线性回归方程△I=29.77C+4.777,相关系数r=0.9998,最低检出限为0.08 mg/L。对4 mg/L的高香草酸连续进行7次平行测定,获得相对标准偏差为1.7%。对尿液中的高香草酸进行分离检测,其加标回收率在86.96%~106.37%之间。在优化的条件下测得5-羟基吲哚乙酸的线性范围为0.1~5 mg/L,线性回归方程△I=30.827C+7.0585,相关系数r=0.9978,最低检出限为0.1mg/L。对4 mg/L的高香草酸连续进行7次平行测定,获得相对标准偏差为1.96%。对尿液中的高香草酸进行分离检测,其加标回收率在84.88%~103.81%之间。结论:毛细管电泳化学发光法用于测定尿液中的8-羟基脱氧鸟苷、高香草酸及5-羟基吲哚乙酸,方法简便快捷,准确可靠。
【关键词】：毛细管电泳 化学发光 Ag(Ⅲ)络合物 Ni(Ⅳ)络合物 鲁米诺
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R446.1
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 第一部分 毛细管电泳-Ag(III)化学发光新体系测定片剂及尿液中的叶酸12-29
• 前言12-13
• 材料与方法13-15
• 结果15-18
• 附图18-23
• 附表23-25
• 讨论25-26
• 小结26-27
• 参考文献27-29
• 第二部分 毛细管电泳-Ni(IV)化学发光新体系检测尿液中 8-羟基脱氧鸟苷与神经递质类代谢产物29-46
• 前言29-31
• 材料与方法31-33
• 结果33-36
• 附图36-41
• 附表41-42
• 讨论42-43
• 小结43-44
• 参考文献44-46
• 结论46-47
• 综述 毛细管电泳-化学发光联用技术应用研究进展47-61
• 参考文献54-61
• 致谢61-62
• 个人简历62-63

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本文编号：1039286