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Kallistatin蛋白对脓毒症大鼠炎症反应及肾组织细胞凋亡的作用

发布时间:2017-10-21 00:30

  本文关键词:Kallistatin蛋白对脓毒症大鼠炎症反应及肾组织细胞凋亡的作用


  更多相关文章: 人激肽释放酶结合蛋白 脓毒症 肾损伤 细胞凋亡


【摘要】:目的:探讨人激肽释放酶结合蛋白(Kallistatin,KS)对脓毒症大鼠炎症反应及肾组织细胞凋亡的作用。法:1、清洁级SD雄性大鼠32只。体重:300±20g,随机分成四组:假手术组(简称为SM,n=8);脓毒症组(简称为CP,n=8);KS重组体腺病毒处理组(简称为KS,n=8);空腺病毒处理组(简称为Ad,n=8)。2、在手术造模前48h,KS组尾静脉注射腺病毒(Ad-KS),转染KS基因,使大鼠体内表达人KS;Ad组尾静脉注射空腺病毒(Ad),不转染基因,不表达人KS。3、四组大鼠造模前12h开始禁食,CP组、KS组和Ad组行盲肠结扎并穿孔,即CLP(cecal ligation and puncture)术,建立脓毒症大鼠模型。SM组只开腹,不进行CLP手术。4、手术结束后24h~48h,将所有存活的大鼠经心脏穿刺采血,ELI SA检测炎症介质;抽血后处死大鼠,快速取双肾组织标本,观察组织(HE染色)病理改变,Western Blot法检测肾组织Bcl-2相关蛋白/B淋巴细胞瘤-2基因(Bax/BCL-2),肾脏损伤因子-1(Kim-1)的表达.结果:1、大鼠肾组织病理切片及HE染色:SM组:肾小球大小正常,饱满,肾小管结构清晰,无坏死,无管型,未观察到炎性细胞增加或浸润的现象。CP组:肾小球出现萎缩,肾小管结构模糊,肾小管上皮细胞出现坏死、少量管型,有炎性细胞浸润。KS组:有肾小管萎缩,但相较CP组少,肾小管结构欠清晰,肾小管上皮细胞有坏死,少量管型,有炎性细胞浸润,相较CP组、Ad组轻。Ad组:肾小球萎缩,肾小管结构欠清晰,肾小管上皮细胞坏死,有管型,有炎性细胞浸润。2、ELISA法检测血清TNF-ɑ、IL-6水平:CP组、Ad组血清TNF-ɑ、IL-6水平较SM组明显升高(P0.05),KS组血清TNF-ɑ、IL-6水平较CP组、Ad组明显下降(P0.05)。3、Western blot检测大鼠肾组织凋亡相关蛋白表达:CP组、Ad组较SM组Bax明显增加(P0.05),但CP组、Ad组、SM组三组间的Bcl-2表达无明显差异。KS组Bax表达较CP组和Ad组减少,而B cl-2表达较其他三组增加(P0.05)。4、Western blot检测大鼠肾组织Kim-1蛋白:CP组、Ad组肾组织Kim-1蛋白的表达较SM组明显增加(P0.05)。KS组肾组织Ki m-1蛋白的表达较CP组、Ad组明显减少(P0.05)。结论:1、Kallistatin蛋白能明显降低脓毒症大鼠血清TNF-ɑ,IL-6水平,从而发挥抗炎作用。2、Kallistatin蛋白能降低脓毒症大鼠肾组织细胞凋亡相关蛋白、KIM-1的表达,从而减轻肾损伤。
【关键词】:人激肽释放酶结合蛋白 脓毒症 肾损伤 细胞凋亡
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R459.7
【目录】:
  • 中文摘要4-7
  • 英文摘要7-10
  • 缩略语表10-13
  • 第一章 前言13-15
  • 第二章 实验材料15-19
  • 第三章 实验方法19-25
  • 第四章 实验结果25-31
  • 第五章 讨论31-35
  • 第六章 结论35-37
  • 参考文献37-41
  • 综述41-51
  • 参考文献47-51
  • 作者攻读学位期间的科研成果51-53
  • 致谢53

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本文编号:1070271

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