人凝血因子Ⅸ-R338A高活性突变体在毕赤酵母中的表达及活性测定

发布时间：2017-12-12 02:06

  本文关键词：人凝血因子Ⅸ-R338A高活性突变体在毕赤酵母中的表达及活性测定

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【摘要】：目的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)在人类内源性凝血过程中起着非常重要的作用。hFⅨ表达量绝对或相对不足会导致B型血友病。本研究用毕赤酵母生产重组高活性突变体hFⅨ-R338A。方法首先构建pPICZaA-hFⅨ-R338A酵母分泌表达载体,其次将其用电转化入毕赤酵母SMD1168中,再次利用G418抗药性的能力筛选表达量高的单克隆重组菌株,培养并将表达产物纯化,稀释后检测其凝血活性。结果通本研究获得的重组SMD1168-hFⅨ-R338A表达量达到(90-120)mg/L;比活力约为人血中野生型hFⅨ凝血活性的(38.93±5.1)%,比野生型的酵母重组hFⅨ高6.85倍。结论人凝血因子Ⅸ高活性突变体R338A是潜在的天然凝血因子替代品。
【作者单位】： 山东省交通医院检验科;
【分类号】：R440
【正文快照】： B型血友病是1种凝血因子Ⅸ异常的X染色体连锁的遗传病,其原因是凝血因子Ⅸ绝对或相对缺乏,导致不同程度的出血倾向[1]。在内源性凝血机制中凝血因子Ⅸ水解成由轻链和重链组成的h FⅨa。h FⅨa可以绑定凝血因子Ⅷ和其他因子共同激活凝血因子Ⅹ从而启动下游的凝血反应。因此,在

【相似文献】

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1 李朝霞,王宏伟,王宁遂,卢大儒,邱信芳,薛京伦;人凝血因子 Ⅸ cDNA 在 C_2C_(12) 细胞中的表达[J];中华儿科杂志;1998年06期

2 ;[J];;年期

，

本文编号：1280739