CYP2C19基因多态性检测方法的建立及临床应用

发布时间：2017-12-15 15:34

  本文关键词：CYP2C19基因多态性检测方法的建立及临床应用

  更多相关文章： CYP2C19 基因多态性 检测方法 主要不良心血管事件 急性冠脉综合征

【摘要】：[目的]建立CYP2C19基因多态性检测方法,并评价其是否能用于临床检测。[方法]参考美国临床生化科学院(NACB)相关要求,对所建立的检测方法进行检测限、重复性、准确度、分析特异性等参数的验证,准确性使用Kappa检验评估,重复性使用符合率,测序质量的验证基于整体测序图谱的荧光信号值、性噪比、测序峰图、QV值等参数。用所建立的检测方法检测昆明医科大学第一附属医院心内科120例PCI术后CAD患者的CYP2C19基因型,根据基因型分布,将患者分为正常代谢组(EM)、中等代谢组(IM)和低代谢组(PM)。收集及样本对应的临床资料,分析三组患者之间基本临床资料是否存在差异。以主要不良心血管事件(MACE)作为主要终点事件、急性冠脉综合正(ACS)为次要终点事件进行为期1年的随访,分析CYP2C19多态性与CAD患者PCI术后1年发生ACS和MACE的相关性。[结果]1.Ct≤32时,PCR扩增曲线正常,测序RFU均在200以上,背景峰不超过靶峰信号值的5%,重复测序20次Ct=-32的DNA样本,结果全部检出；我科实验室得到的测序结果与第三方实验室的检测结果100%一致,Kappa=1.0;测序分析批内和批间重复性结果符合率均为100%,提取溶血、脂血及白细胞含量异常全血样本的DNAOD260/OD280在1.8-2.0之间,浓度和质量均满足PCR和测序。2.120例患者的CYP2C19基因多态性结果为：*2位点基因型GG、GA、AA分别有57例、52例和11例；*3位点基因型GG、GA、AA分别有113例、4例和3例。3.3组不同代谢表型患者的性别、年龄、既往史、吸烟及药物服用情况不具明显差异。PCI术后一年随访期间,1例(0.8%)死亡,6例(5%)非致死性心肌梗死,4例(3.3%)支架血栓事件,26例(21.7%)变异型心绞痛。不同代谢表型组ACS与MACE的发生率具有明显差异(P0.05)。4.非条件Logisti回归分析显示：同时患有糖尿病的PCI术后CAD患者1年随访期间MACE的发生率较未患糖尿病的患者高(OR=0.163,95%CI 0.035-0.766, P=0.022);吸烟患者1年随访期间ACS的发病率较非吸烟患者低(OR=5.273,95%CI 1.339-20.758; P=0.017);IM和PM组的患者随访期间MACE (OR=5.119,95%CI 1.276-20.541, P=0.021)和ACS (OR=4.779,95%CI 1.918-11.912; P=0.001)的发病率均较EM组的患者高。[结论]基于荧光PCR-毛细管电泳测序技术的CYP2C19基因多态性检测法可检测CYP2C19*2(G681A)和*3(G636A)功能多态性位点,可满足临床检测。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R541.4;R446.1

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