曲古霉素A促进ICR小鼠骨髓间充质干细胞体外分化为肝细胞

发布时间：2018-01-15 09:34

本文关键词：曲古霉素A促进ICR小鼠骨髓间充质干细胞体外分化为肝细胞　出处：《华中科技大学学报(医学版)》2017年02期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨曲古霉素A(trichostatin A,TSA)在ICR(Institute of Cancer Research,ICR)小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)向肝细胞体外分化中的作用。方法分离培养正常小鼠mBMMSCs,流式细胞仪检测mBM-MSCs表面抗原,实时荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因甲胎蛋白(!-fetoprotein,AFP)和白蛋白(albumin,ALB),生化分析仪测定尿素分泌量,高碘酸-希夫反应测定肝细胞合成与储存糖原能力;检测TSA处理前后mBM-MSCs增殖、细胞周期和染色质结构的变化,Western blot测定mBM-MSCs组蛋白3(Histone 3,H3)和组蛋白4(Histone 4,H4)乙酰化程度改变。结果分离所得mBM-MSCs细胞表面CD44、CD73、SCA-1呈阳性反应,部分细胞CD90、CD105、STRO-1呈阳性反应,CD11b和CD45呈阴性反应;与未添加TSA组比较,诱导7d后,TSA处理组中AFP明显增高(P0.05),ALB和尿素分泌量开始增多,继续诱导14和21d后,TSA处理组中ALB分别为(0.52±0.08)和(0.92±0.08),呈明显升高(均P0.05),尿素分泌量分别为(0.23±0.02)mmol/L和(0.36±0.03)mmol/L,也呈明显升高(均P0.05),且细胞储存的糖原更加丰富,而AFP水平逐渐下降;经TSA处理后,TSA浓度越大对mBM-MSCs增殖的抑制效应越强,细胞处于G0/G1期的比例明显增加,细胞核中异染色质的状态由浓缩、密集变为散状、疏松;Western blot结果显示2.0mmol/L TSA处理后mBM-MSCs组蛋白H3和H4的乙酰化水平显著增加(均P0.05)。结论 TSA能够阻断mBM-MSCs组蛋白H3和H4的去乙酰化,打破组蛋白乙酰化的平衡状态,解除转录抑制,从而促进转录,提高其向肝细胞分化的效率。
[Abstract]:The expression of CD44 , CD73 , SCA - 1 in bone marrow mesenchymal stem cells ( BM - MSCs ) in ICR ( Institute of Cancer Research , ICR ) mice was studied . The results showed that TSA could block the acetylation of mBM - MSCs from histone H3 and H4 , break down the equilibrium state of histone acetylation , and then promote transcription and improve the efficiency of differentiation of mBM - MSCs .

【作者单位】：西安医学院第一附属医院检验科;浙江省绍兴市人民医院临床检验中心;
【基金】：陕西省教育厅专项科研计划项目(No.12JK0764) 西安医学院第一附属医院科研基金资助项目(No.XYFY11-08)
【分类号】：R446.1
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchy-mal stem cells,BM-MSCs)是一类具有高度可塑性和多向分化潜能的成体干细胞[1-4]。近年来,学者们采用多种动物模型和不同分化诱导技术,探讨分化的可能机制过程,证实BM-MSCs体外可以分化为肝样细胞[5-8],但分化诱导效率低,不足以应用到

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