AdeABC外排泵系统与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的关系

发布时间：2018-06-23 15:48

  本文选题：鲍曼不动杆菌 + 外排泵AdeABC系统　； 参考：《中南大学学报(医学版)》2017年04期

【摘要】：目的:探讨外排泵AdeABC系统与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的关系。方法:采用美罗培南多步法体外诱导敏感鲍曼不动杆菌获得对碳青霉烯类药物耐药的菌株;采用E-test法定量检测诱导前后菌株的敏感性;羰基氰化物间氯苯腙(carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazone,CCCP)抑制试验筛查外排泵;PCR及测序分析诱导前后AdeABC系统的调控基因adeS,adeR及主要碳青霉烯酶基因的变化;荧光定量PCR检测诱导前后adeA,adeB,adeR和adeS基因m RNA的表达量。结果:亲代敏感菌株S25595和S7257的美罗培南最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)分别为0.38和0.25μg/m L,诱导后MIC均32μg/m L;与亲代敏感株相比,诱导耐药株adeA,adeB,adeR和adeS基因的m RNA表达量上升2.45~9.44倍,但调控基因adeS和adeR没有基因突变或插入序列。结论:外排泵AdeABC系统高表达与鲍曼不动杆菌对美罗培南耐药密切相关,其表达水平升高不是由调控基因adeS和adeR序列中基因突变或插入序列引起,可能存在其他机制。
[Abstract]:Objective: to investigate the relationship between the AdeABC system of efflux pump and the resistance of Acinetobacter baumannii to carbapenems. Methods: Acinetobacter baumannii was induced by meropenem multistep method in vitro to obtain carbapenem resistant strains, and E-test method was used to detect the sensitivity of the strains before and after induction. Carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazoneuridine (CCCP) inhibition test was used to screen exudation pump PCR and sequencing to analyze the changes of AdeABC regulatory gene adeSadeR and major carbapenem enzyme genes before and after induction, and fluorescence quantitative PCR was used to detect the expression of adeAde BadeR and adeS gene mRNA before and after induction. Results: the minimum inhibitory concentrations (minimal inhibitory) of meropenem were 0.38 and 0.25 渭 g / mL, respectively, in parent sensitive strains S25595 and S7257, respectively, and the mics were 32 渭 g / mL after induction, and the mRNA expression of the genes of adeAde BadeR and adeS increased by 2.459.44 times compared with the susceptible strains of parental strain S25595 and S7257, and the results showed that the minimal inhibitory concentration of meropenem was 0.38 渭 g / mL and 0.25 渭 g / mL, respectively. However, the regulatory genes adeS and adeR had no mutation or insertion sequence. Conclusion: the high expression of AdeABC system in efflux pump is closely related to the resistance of Acinetobacter baumannii to meropenem, and the increased expression level of AdeABC is not caused by gene mutation or insertion sequence in the regulatory gene adeS and adeR, and there may be other mechanisms.
【作者单位】： 中南大学湘雅医院检验科;
【基金】：湖南省自然科学基金(14JJ7003) 湖南省2012年科技基本建设投资计划(湘发改高技[2012]1493号) 中南大学中央高校基本科研业务费专项资金(2013zzts317)~~
【分类号】：R446.5

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本文编号：2057642