不同贮存时间红细胞对内毒素休克家兔肺损伤影响的研究

发布时间：2019-08-06 18:19

【摘要】：目的:通过内毒素休克家兔输注不同贮存时间红细胞观察其对家兔肺组织病理变化、肺表面活性蛋白A(Surfactant Protein-A,SP-A)、氧化应激相关蛋白、细胞因子表达的影响,探讨不同贮存时间红细胞对内毒素休克家兔肺损伤的影响,综合评价不同贮存时间红细胞在内毒素休克模型中的安全性及有效性。方法:选择清洁级健康雄性新西兰家兔74只,体重2.0~2.5kg,采用随机数字表法将其中10只分为献血组,另外64只动物分为8组(n=8):C组(空白对照组),S组(失血组),L组(内毒素组),SL组(失血+内毒素组),R组(失血+内毒素+红细胞组,以输注的红细胞贮存时间1d、1w、2w、3w,分为R0-R3组,共4个亚组)。S组、SL组、R组实验开始前一天家兔称重,各组家兔于耳中央动脉抽15%血容量的血液(血容量按体重的7%计算)。实验开始后,各组家兔耳缘静脉静注3%戊巴比妥钠1.5ml/kg麻醉,常规固定,行颈内动脉穿刺置管并测压。随后L组、SL组、R组经耳缘静脉输入脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)5mg/kg(溶于1ml生理盐水),C组、S组输入等量生理盐水。静注LPS 2h后L组、SL组、R组以平均动脉压(Mean Arterial Pressure,MAP)下降≥25%、氧合指数(Oxygenation Index,OI)≤300 mmHg为模型制备成功。R组各组输入5%血容量的贮存悬浮红细胞,分别用贮存1d红细胞(R0组),贮存1 w红细胞(R1组),贮存2 w红细胞(R2组),贮存3 w红细胞(R3组),以及适量的乳酸钠林格氏液维持MAP65 mmHg。C组、L组、SL组给予适量的乳酸钠林格氏液维持MAP65mmHg。另外,分别于动脉穿刺完成静注LPS前(T1)、静注LPS 2h(T2)、静注LPS 6h后(T3)三个时点检测各组家兔血清白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-8(Interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,tnf-α)的变化。在t3时点处死家兔,取左肺下叶做病理检测,取右肺下叶测定湿/干重比(wet/dryratio,w/d),右肺上叶组织匀浆后检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,mpo)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,sod)、一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,nos)的活性以及丙二醛(malondialdehyde,mda)、sp-a含量的变化。结果:(1)与c组、s组比较,l组、sl组、r0组、r1组、r2组、r3组肺损伤评分增大(p0.05),与l组、sl组比较,r2组、r3组肺损伤评分增大(p0.05),与r0组比较,r2组、r3组肺损伤评分增大(p0.05)。(2)t2、t3时刻与c组、s组比较,l组、r0组、r1组、r2组、r3组map、oi显著减小(p0.05)。(3)与c组、s组比较,l组、sl组、r0组、r1组、r2组、r3组w/d均显著增大(p0.05);与l组、sl组比较,r3组w/d显著增大(p0.05)。(4)与c组、s组比较,l组、sl组、r0组、r1组r2组、r3组mpo活性、mda含量均显著增大(p0.05)而sod活性显著下降(p0.05);与l组、sl组比较r1组、r2组、r3组mpo活性显著增大、sod活性显著减小(p0.05),r0组、r1组、r2组、r3组mda显著增加(p0.05);与r0组比较,r2组与r3组mpo活性、mda显著增高,sod活性显著减小(p0.05);与r1组比较,r2组、r3组mda含量,r3组mpo活性显著增高,sod显著减小(p0.05);与r2组比较,r3组mda显著增高,sod显著减小(p0.05)。(5)与c组、s组比较,l组、r0组、r1组、r2组、r3组nos活性均显著增大(p0.05);与l组、sl组比较,r0组、r1组、r2组、r3组差异无统计学意义。(6)与c组、s组比较,l组、r0组、r1组、r2组、r3组sp-a均显著减少(p0.05);与l组、sl组比较,r2组、r3组均显著减少(p0.05);r2组、r3组比r0组、r1组减少,但各r组组间比较无统计学差异(p0.05)。(7)t2、t3时间点,与c组、s组比较,l组、sl组、r0组、r1组、r2组、r3组tnf-α、il-1β、il-8显著增大(p0.05);t3时间点,r3组与l组、r0组、r1组比较,il-8显著增大(p0.05)。r3组与其他各组相比il-1β增加显著(p0.05)。结论:(1)氧化应激参与了内毒素休克肺损伤的发生。(2)随着红细胞贮存时间的延长,会引起内毒素休克家兔MDA、MPO增加,SOD下降,但没有影响NOS、SP-A的生成。(3)当发生内毒素休克且需要输入红细胞时,选择输入贮存时间14天以内的红细胞为宜。
【图文】：

不同贮存时间红细胞对内毒素休克家兔肺损伤影响的研究,陶强;2017年

图1.6 R1组肺泡壁上可见中性粒细胞，局部肺泡壁增粗，肺泡腔受挤压变狭窄（×400）图1.7 肺泡间隔增宽，较多出血、渗出（×400）图1.8 R3组肺泡腔出血几乎充满肺泡腔（×400）

不同贮存时间红细胞对内毒素休克家兔肺损伤影响的研究,陶强;2017年

图1.3 L组局部肺泡壁增粗，肺泡壁上可见中性粒细胞（×400）图1.4 SL组肺泡壁增粗，血管内可见中性粒细胞（×400）图1.5 R0组肺泡壁毛细血管扩张充血，，肺泡壁增粗（×400）图1.6 R1组肺泡壁上可见中性粒细胞，局部肺泡壁增粗，肺泡腔受挤压变狭窄（×400）
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R457.1

【参考文献】