抗CD14单克隆抗体对脓毒症大鼠肺组织KC和ICAM-1表达的影响

发布时间：2019-10-23 19:44

【摘要】：目的:探讨抗CD14单克隆抗体(Anti-CD14 monoclonal antibody,Anti-CD14McAb)治疗大鼠脓毒症急性肺损伤的保护机制。方法:在体部分:18只雄性Wistar大鼠(200g-250g)随机均分为3组,脓毒症组(CLP组)、假手术组(Sham组)、抗CD14治疗组(Anti-CD14组)。CLP组和Anti-CD14组,采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症急性肺损伤模型,Sham组作为对照组,开腹后只翻动盲肠,不进行结扎穿孔。Anti-CD14组术后经股静脉注射Anti-CD14McAb 0.2ml(1ug/ml),Sham组、CLP组术后经股静脉注射等量生理盐水0.2ml,6小时后经腹主动脉抽血,测定3组大鼠血浆中KC、sICAM-1表达水平,右肺下叶HE染色,观察肺组织病理结构的改变。离体部分:将培养的NR8383一部分接种于24孔培养板,分为3组,对照组(Ⅰ组)、脓毒症模型组(Ⅱ组)和Anti-CD14干预组(Ⅲ组)。Ⅰ组加入正常血浆,Ⅱ组加入脓毒症血浆,Ⅲ组加入脓毒症血浆和抗CD14单克隆抗体共同干预,37℃、5%CO2培养箱孵育1小时,刮取NR8383,采用Western blot测定NR8383内NF-κB(p65)蛋白的表达水平;另一部分接种在预先放入适当大小灭菌消毒的盖玻片的24孔板上,分组及干预措施同上,采用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测NR8383内NF-κB(p65)蛋白入核情况。结果:在体实验提示:与Sham组[KC(pg/ml):72.645±19.860,sICAM-1(pg/ml):252.766±19.921]相比,CLP组血浆KC、sICAM-1水平[KC(pg/ml):490.316±43.403,sICAM-1(pg/ml):686.952±36.411]和Anti-CD14组血浆KC、sICAM-1水平[KC(pg/ml):348.150±20.924,sICAM-1(pg/ml):411.050±47.170]明显升高,而Anti-CD14组KC、sICAM-1水平明显低于CLP组,认为有统计学差异(P0.05);肺组织病理结果提示CLP组肺间质明显增厚、肺间质及肺泡腔内有大量炎症细胞浸润,Anti-CD14组症状较CLP组明显减轻,但较Sham组有所增加;细胞实验Western blot检测显示:Ⅱ组(2.1903±0.1199)和Ⅲ组(1.3658±0.1018)NR8383的NF-κB(p65)入核量高于Ⅰ组(1.0122±0.0780),Ⅲ组的NF-κB(p65)入核量低于Ⅱ组,差别有统计学意义(P0.05)。细胞实验CLSM检测结果提示:与Ⅰ组(0.131±0.009)相比,Ⅱ组(0.685±0.037)和Ⅲ组(0.210±0.008)NR8383NF-κB p65蛋白入核明显升高,而Ⅲ组NR8383NF-κB p65蛋白入核低于Ⅱ组(0.685±0.037),差别有统计学意义(P0.05)。结论:Anti-CD14McAb在脓毒症急性肺损伤时可能调控肺泡巨噬细胞NF-κB(p65)蛋白入核,使其趋化因子KC表达减少,进而减少中性粒细胞浸润,起到肺保护作用;同时Anti-CD14McAb能抑制内皮细胞表达sICAM-1,减少中性粒细胞对内皮细胞的粘附作用,起到肺保护作用。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R459.7

【参考文献】