创面持续恒温加热敷料对于小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响

发布时间：2020-04-02 22:35

【摘要】：目的验证创面持续恒温加热敷料有利于创面愈合,探讨创面持续恒温加热敷料对于创面修复的作用及相关机制。方法将40只C57BL/6小鼠按随机数字表法均分为2组,即实验组和对照组,每组20只。两组均构建直径10mm圆形的抗收缩全层皮肤缺损模型。实验组持续加热维持创面恒定36℃并持续记录温度数据,对照组持续关闭敷料加热开关并持续记录创面温度数据。于术后第7d、10d、14d,每组分别随机取4只处死,在对创面进行大体观拍照后计算创面愈合率;取创面组织,行苏木素-伊红染色观察组织病理学情况;免疫组织化学染色观察CD31、α-SMA的表达分布;实时荧光定量反转录-聚合酶链反应检测创面组织中CD31、α-SMA、VEGF、collagen I、collagenⅢ、IL-6、IL-10 的 mRNA 表达;蛋白质印迹法检测 CD31、α-SMA、VEGF、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、IL-6、IL-10的蛋白表达。对数据行正态性检验和方差齐性分析后,各时间点两组间比较行Student-t检验。结果(1)大体观结果显示,术后第10d、14d,实验组创面面积小于对照组,具有统计学差异(p0.05)。术后第7d、10d、14d,实验组创面愈合率显著高于对照组,差异具有统计学意义(p0.05)。(2)苏木素/伊红(HE)染色结果显示,在术后10d、14d,实验组再生的上皮组织和肉芽组织较对照组厚,成纤维细胞、新生血管和胶原沉积明显多于对照组。(3)对照CD31与α-SMA免疫组化染色结果及血管计数结果,实验组在术后第10d、14d的新生血管和成熟血管计数多于对照组(p0.05或p0.01)。qRT-PCR检测两组小鼠创面中的CD31、α-SMA、VEGF的mRNA的相对分子表达量都随着术后时间的增加而逐步增加;术后第7d,实验组创面α-SMA、VEGF的mRNA相对表达量高于对照组(p0.05);术后第10d,两组创面CD31、α-SMA、VEGF的mRNA相对表达量均高于对照组(p0.05或p0.01);术后第14d,实验组的CD31、α-SMA相对表达量高于对照组(p0.05或p0.01)。蛋白电泳结果与免疫组化及qRT-PCR检测的结果基本相一致。(4)两组创面collagen I、collagen Ⅲ的mRNA的相对表达量都随着术后时间的增加而逐步升高。术后第7d、14d,实验组collagen I、collagen Ⅲ的mRNA相对表达量高于对照组(p0.05或p0.01);术后第10d,实验组collagen I的mRNA表达量高于对照组(P＜0.01)。两组术后第7d、10d、14d的collagenI、collagen Ⅲ的蛋白表达水平,随着时间的延长,两组collagen I、collagen Ⅲ、的蛋白表达量均逐渐增加,各时间点实验组的蛋白表达量增加均高于对照组。(5)在术后第7、10、14d,两组小鼠创面组织中的IL-6mRNA的相对表达量均随着术后时间增加而逐步减少。术后第7d,实验组IL-6的mRNA相对表达量少于对照组(p0.01);术后第14d,实验组IL-6的mRNA的相对表达量显著低于对照组(p0.05)。在术后第7、10、14d,两组的IL-10的mRNA的相对表达量都随着术后时间的增加而逐步地减少,实验组的相对表达量均高于对照组(p0.05)。Westernblot检测两组创面术后第7d、10d、14d的IL-6、IL10蛋白水平表达的变化,与qRT-PCR检测的结果趋势基本相一致。结论创面持续恒温加热敷料可促进小鼠全层皮肤缺损创面愈合,其机制可能与促进小鼠皮肤血管化、创面上皮化进程、胶原沉积及抑制炎症反应有关。
【图文】：

验组小鼠创面的温度值（Ｂ）为３６．０３±０．０５°Ｃ。逡逑３．２动物实验大体观察逡逑术后第３ｄ、５ｄ、７ｄ、１０ｄ、１４邋ｄ，创面拍照记录，结果如图３－２所示。总体上，逡逑随着术后时间点的延长，两组创面面积为逐渐减小的趋势。通过软件Ｉｍａｇｅ邋Ｊ测量逡逑创面面积，得到如表３－１所示的数据，术后第３ｄ、５ｄ、７ｄ，实验俎创面面积小于逡逑对照组，但不具有统计学差异（ｐ＞０．０５）；在术后第１０ｄ、１４ｄ，实验组创面面积逡逑１１逡逑

逦１５逡逑术后时间（天）逡逑图３－１术后０ｄ—１４ｄ对照组小鼠创面的温度值（Ａ）为３１．４９±１．１８°Ｃ；实逡逑验组小鼠创面的温度值（Ｂ）为３６．０３±０．０５°Ｃ。逡逑３．２动物实验大体观察逡逑术后第３ｄ、５ｄ、７ｄ、１０ｄ、１４邋ｄ，创面拍照记录，结果如图３－２所示。总体上，逡逑随着术后时间点的延长，，两组创面面积为逐渐减小的趋势。通过软件Ｉｍａｇｅ邋Ｊ测量逡逑创面面积，得到如表３－１所示的数据，术后第３ｄ、５ｄ、７ｄ，实验俎创面面积小于逡逑对照组，但不具有统计学差异（ｐ＞０．０５）；在术后第１０ｄ、１４ｄ，实验组创面面积逡逑１１逡逑
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R473.6

【参考文献】

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1 梁超英;钱志余;;人体组织传热及应用研究[J];生物医学工程研究;2007年02期

本文编号：2612530