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丰富环境改善小鼠放射性认知功能障碍

发布时间:2020-05-12 18:09
【摘要】:【目的】探讨丰富环境对电离辐射所致小鼠认知功能障碍的保护作用及其可能的机制。为临床放射性认知功能障碍的防治工作提供新的思路。【方法】(1)动物分组:36只健康成年雌性昆明小鼠随机分为对照组、辐射组(IR)和辐射丰富环境组(IR+EE)。(2)模型建立:小鼠采用~(137)Csγ射线进行全身辐照至吸收剂量4 Gy,构建放射性认知功能障碍模型;IR+EE组小鼠在辐照后第二天起给予连续35 d的EE刺激;(3)行为学检测:使用新物体识别实验检测小鼠认知功能;(4)生物化学检测:采用免疫组织化学法检测小鼠海马脑区神经发生标记物双皮质素(DCX)及磷酸化环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(p-CREB)的表达;采用免疫蛋白印迹法检测海马区CREB及p-CREB的表达。【结果】(1)小鼠新物体识别实验结果:与对照组相比,IR组小鼠新物体分辨率明显降低(P0.05);与IR组小鼠相比,IR+EE组小鼠新物体分辨率明显增加(P0.05)。(2)小鼠海马区DCX结果:与对照组相比,IR组小鼠海马区DCX阳性细胞数明显减少(P0.05);与IR组小鼠相比,IR+EE组小鼠海马区DCX阳性细胞数明显增加(P0.05)。(3)小鼠海马区CREB及p-CREB的表达情况:免疫蛋白印迹法及免疫组织化学法检测结果显示,与对照组相比,IR组小鼠海马区CREB表达无明显减低,p-CREB蛋白及p-CREB/CREB表达下调(P0.05);与IR组小鼠相比,IR+EE组小鼠CREB蛋白表达无差异(P0.05),而p-CREB蛋白及p-CREB/CREB表达上调(P0.05)。【结论】1.丰富环境对电离辐射所致小鼠认知功能障碍具有改善作用。2.丰富环境可通过激活海马区CREB蛋白的表达,促进海马神经发生,从而改善放射性认知功能障碍。
【图文】:

小鼠,免疫组织化学染色,对照组,蛋白表达


14图 1 辐照后各组小鼠海马区 DCX 的表达变化:(a)免疫组织化学染色 DCX 的表达,Bar=100μm in A-C, Bar=50μm in D-F;(b)DCX 阳性细胞统计结果,**与对照组相比,P<0.01;#与辐射组相比,P<0.05。3.3 小鼠海马区 CREB 及 p-CREB 的表达情况小鼠海马区 CREB 及 p-CREB 的表达情况如图 2 所示。图 2(a)为各组原始条带。由图 2(b)~2(d)可知,与对照组相比,IR 组小鼠海马区 p-CREB/CREB 表达下调(图 2(b),1.007 ± 0.058 vs. 0.772 ± 0.039,P<0.05),p-CREB 蛋白表达下调(图 2(c),1.000 ± 0.021 vs. 0.762 ± 0.035,P<0.01),而 CREB 蛋白表达无差异(图 2(d),,1.000 ± 0.104 vs. 1.013 ± 0.057,P>0.05),提示电离辐射可诱使海马CREB 蛋白磷酸化减少。而与 IR 组相比,IR+EE 组小鼠海马区 p-CREB/ CREB表达上调(0.772 ± 0.039 vs. 1.014 ± 0.093,P<0.05),p-CREB 蛋白表达上调(0.762 ±

小鼠,对照组,免疫组织化学法,海马


图 2 辐照后各组小鼠海马区 CREB 及 p-CREB 的表达情况:(a) Western blotting 显示各组小鼠海马区 CREB 及 p-CREB 蛋白的表达;(b) p-CREB/CREB 蛋白定量分析,*与对照组相比,P<0.05;#与辐射组相比,P<0.05;(c) p-CREB 蛋白定量分析,**与对照组相比,P<0.01;##与辐射组相比,P<0.01; (d) CREB 蛋白定量分析。为进一步验证上述结果,使用免疫组织化学法检测海马区 p-CREB 的表达情况,结果显示:与对照组相比,IR 组海马脑区 p-CREB 表达水平较低;而经丰富环境刺激后 p-CREB 的表达上调(P<0.05),如图 3。
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R730.55

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本文编号:2660628

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