脑肠肽在大鼠心肺复苏后心功能不全中的作用研究

发布时间：2020-11-05 03:31

　　 【目的】文献报导,全身性类脓毒症样反应是心脏骤停及心肺复苏后一个重要的病理生理变化。本实验通过建立大鼠心肺复苏模型,观察复苏后心功能不全中炎性反应的变化,并探讨脑肠肽是否对复苏后心肌组织炎性改变具有调控作用以及是否对复苏后大鼠的心功能具有保护作用。【方法】实验一,250-300g健康SD大鼠经皮电刺激心外膜制备心脏骤停模型后予以小动物呼吸机辅助通气,胸外按压成功复苏后,分别在1小时,3小时,6小时,24小时处死大鼠,并利用生理信号记录监测大鼠室颤前及ROSC后各时间点心电图及血流动力学指标。取心脏进行western blot实验,分析NLRP3炎症通路关键蛋白(ASC、NLRP3和Casepase1)的表达趋势。实验二,250-300g健康SD大鼠随机分为3组:(1)空白对照组(sham组);(2)NS+CPR组(NS组);(3)Ghrelin+CPR组(GH组)。成功建立心脏骤停及心肺复苏模型后,ROSC后6小时,通过TTC法测量大鼠心肌坏死面积(3只/组);通过HE染色和TUNEL染色观察ROSC后大鼠心肌受损情况和凋亡情况(3只/组);其余大鼠留取心脏及血清标本:(1)通过ELISA法检测各组血清中心肌酶的含量(c Tn I、LDH);(2)通过ELISA法检测心肌组织中炎症因子水平(IL-1β,IL-18,TNF-α);(3)通过试剂盒检测各组心肌组织中髓过氧化物酶(MPO)含量;(4)利用试剂盒检测各组心肌组织中丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;(5)利用western blot和免疫组化检测各组心肌组织中炎性通路ASC、casepase1、NLRP3和IL-1β的表达情况。【结果】实验一,成功复苏大鼠后,在复苏成功后6小时内,大鼠的血流动力学各项指标呈加重趋势,24小时后,各组之间大鼠心功能无明显差异。心肌组织中,ASC、NLRP3和casepase1的表达在ROSC后6小时内持续增加,24小时有所下降。实验二,(1)各组心脏TTC染色结果发现,sham组心肌无明显缺血灶,NS组和GH组心脏标本均有不同程度的缺血灶,而GH组心脏缺血灶面积百分比明显低于NS组;(2)HE染色和TUNEL染色发现,sham组心肌组织结构比较完整,排列整齐,而GH和NS组心肌组织有不同程度的损伤,其中GH组相较于NS组,心肌损伤较轻且凋亡细胞明显少于NS组(P0.05)。和与sham组相比,NS组和GH组血清中心肌酶均有升高(P0.05),且GH明显降低了心肌酶的释放(P0.05);(3)与sham组相比,NS组和GH组炎症因子水平(IL-1β,IL-18,TNF-α)明显升高(P0.05),与NS组相比,GH组炎症因子水平显著降低(P小于0.05);(4)与sham组比,NS组和GH组心肌组织中MPO明显增多(P0.05),与NS组相比,GH组心肌组织中MPO则显著降低(P0.05);(5)与sham组相比,NS组和GH组MDA活性增加,SOD活性下降(P0.05),而与NS组比较,GH组MDA活性下降,SOD活性上升(P0.05)。(6)WB检测发现,与sham组比较,NS和GH组ASC、casepase1、NLRP3和IL-1β的表达均有不同程度的增强(P0.05),而GH组ASC、casepase1、NLRP3和IL-1β的表达则有不同程度的下降(P0.05)。【结论】本实验发现了炎症反应参与调控了大鼠复苏后心功能不全,并探讨了脑肠肽在心肺复苏领域中的运用。本实验证实了脑肠肽可以抑制复苏后心肌组织中的炎性改变,改善复苏后的心功能不良,并减少心肌组织损伤和凋亡,这一作用可能与其抑制复苏后心肌组织炎性改变有关。
【学位单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R459.7
【部分图文】：

171.4.2 监测 GH 对大鼠血流动力学的影响1.实验分组 本实验分三组，Sham 组（空白对照组）、NS 组（盐水组）、GH组，每组 5 只。2.给药管理 用生理盐水将 GH 溶解（1mg/ml）后，于-80℃冰箱内分装保存。在每次使用前，将 GH 溶液以生理盐水稀释 20 倍。当大鼠 ROSC 后，立即以 80μg/mg 剂量经股静脉推入。NS 组在同一时间点推入等剂量生理盐水。3. 血流动力学指标及监测时间点 分别在大鼠诱导室颤前和 ROSC 后

各?

22由表 1-2 及图 1-7 系列可知，在 ROSC 后，NS 组和 GH 组在各时间点的大鼠心率与 Sham 组差异不明显（P＞0.05），且 NS 组和 GH 组之间也无明显差异（P＞0.05）；NS 组和 GH 组大鼠在 6h 内，各时间点 MAP、+Dp/Dtmax 及-Dp/Dtmax均明显低于 Sham 组；在 1h 处，NS 组与 GH 组上述指标无明显差异（P＞0.05）；而 GH 组在 3h、6h 的 MAP、+Dp/Dtmax 及-Dp/Dtmax 值均明显高于 NS 组。而三组大鼠在 24h 时，血流动力学指标均无明显差异（P＞0.05）。图 1-7 系列中 表示与 SHAM 组相比，P＜0.05； 表示与 SHAM 组相比，P＜0.01； 表示与 SHAM 组相比，P＜0.001；﹟表示与 GH 组相比，P＜0.01；＊表示与 GH 组相比，P＜0.05。
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本文编号：2871061