大理地区非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定及耐药性分析
发布时间：2020-12-07 10:01
目的:对大理地区疑似非结核分枝杆菌（（Non-tuberculous mycobacteria,NTM）的临床分离株进行菌种鉴定;通过药敏试验检测NTM的耐药性,分析NTM耐药菌株对利福平、异烟肼耐药相关基因rpoB和inhA的基因突变情况,初步研究NTM的耐药机制。方法:1.非结核分枝杆菌临床分离株的的菌种鉴定:运用PNB/TCH鉴别培养基将18株疑似NTM的临床株进行初步菌种鉴定,再设计16SrRNA引物,以初步鉴定为NTM的临床分离株的DNA为模板进行聚合酶链反应（Polymerase chain reaction,PCR）,PCR扩增产物送测序公司测序,将结果提交NCBI-BLAST网站,与GenBank中的标准序列进行比较和同源性分析,获得菌种鉴定结果。结果所得2株脓肿分枝杆菌再用hsp65和rpoB引物进行PCR扩增、测序、BLAST比对后,可以将此2株脓肿分枝杆菌（Mycobacterium abscessus,M.abscessu）鉴定为不同亚种。2.非结核分枝杆菌的耐药性研究（1）非结核分枝杆菌的药物敏感性测定:采用比例法对所有NTM进行包括异烟肼（Isoniazid...
【文章来源】：大理大学云南省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图1.1分枝杆菌抗酸染色（100×）
图 1.2 分枝杆菌在中性罗氏培养基上的培养结果Fig 1.2 The result of Mycobacterium in Neutral Roche medium养基初步菌种鉴定结果种于 TCH、PNB 和中性罗氏培养基（L-J）后，经 4 周培养后，杆菌生长情况，发现所有菌株在中性罗氏培养基（L-J）上均生果可以采用。以 NTM 在 PNB/TCH 培养基上均要生长这一特点养基法将 18 株临床分离株进行初步菌种鉴定，鉴定结果如表 1. 14 株、人型结核分枝杆菌 3 株和牛型结核分枝杆菌 1 株。表 1.4 鉴别培养基的菌种鉴别结果Table 1.4 The results of identification medium菌种 Strain NTM M.tuberculosis M.bovis鉴定结果 PNB (+) TCH (+) PNB (－) TCH (+) PNB (－) TCH (－菌株数（株） 14 3 1
16S rRNA 基因 PCR 扩增电泳图。（M:DL 2000 Marker; H:标准株-7 的 PCR 产物）ification of different strains of 16SrRNA gene (M: Nucleic acid markeains H37Rv; 1-7: PCR products of strains)因的扩增及测序结果 NTM 的临床分离株的 hsp65 基因在经 PCR 扩增后，同大小约为 365bp 的 DNA 片段，见图 1.4，分别回收、测过与 GenBank 中的标准序列相比较，可鉴定出脓肿分枝
【参考文献】：
期刊论文
[1]AIDS合并非结核分枝杆菌肺病的诊治进展[J]. 黄葵,李勇. 传染病信息. 2017(02)
[2]非结核分枝杆菌肺病诊治研究进展[J]. 黄葵,李勇. 内科. 2017(02)
[3]免疫支持对非结核分枝杆菌肺病患者疗效影响[J]. 江万航,刘国标,杜正新,李方知. 广州医药. 2017(02)
[4]非结核分枝杆菌病实验室诊断技术及药敏试验研究进展[J]. 郭明日,张丽霞. 淮海医药. 2017(02)
[5]贵州省结核分枝杆菌临床分离株MIRU-VNTR位点基因分型研究[J]. 孙荣,毕雅坤,欧维正,王燕,秦万,蒙俊,陈峥宏. 中国病原生物学杂志. 2017(01)
[6]浅谈非结核分枝杆菌肺病的流行及诊断[J]. 刘汝建,王进. 中国继续医学教育. 2017(02)
[7]耐多药结核分枝杆菌基因位点表达研究[J]. 戚应杰,查晓丹. 实用医学杂志. 2016(24)
[8]艾滋病合并非结核分枝杆菌病研究进展[J]. 梁佩佩,卢洪洲. 临床内科杂志. 2016 (10)
[9]非结核分枝杆菌肺病的诊断与治疗研究进展[J]. 刘国威,白大鹏,梅早仙. 中国城乡企业卫生. 2016(06)
[10]非结核分枝杆菌病实验室诊断专家共识[J]. 中华结核和呼吸杂志. 2016 (06)
博士论文
[1]浙江地区非结核分枝杆菌在疑似肺结核患者中的流行研究[D]. 毕晟.浙江大学 2015
硕士论文
[1]RNA恒温扩增实时检测技术鉴定常见致病非结核分枝杆菌研究[D]. 李园园.苏州大学 2014
[2]非结核分枝杆菌的菌种鉴定、药敏试验和耐药机制的研究[D]. 聂文娟.北京市结核病胸部肿瘤研究所 2014
[3]应用16s rRNA基因序列分析鉴定非典型细菌的实验研究[D]. 沈亚娟.重庆医科大学 2012
本文编号：2903059
【文章来源】：大理大学云南省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图1.1分枝杆菌抗酸染色（100×）
图 1.2 分枝杆菌在中性罗氏培养基上的培养结果Fig 1.2 The result of Mycobacterium in Neutral Roche medium养基初步菌种鉴定结果种于 TCH、PNB 和中性罗氏培养基（L-J）后，经 4 周培养后，杆菌生长情况，发现所有菌株在中性罗氏培养基（L-J）上均生果可以采用。以 NTM 在 PNB/TCH 培养基上均要生长这一特点养基法将 18 株临床分离株进行初步菌种鉴定，鉴定结果如表 1. 14 株、人型结核分枝杆菌 3 株和牛型结核分枝杆菌 1 株。表 1.4 鉴别培养基的菌种鉴别结果Table 1.4 The results of identification medium菌种 Strain NTM M.tuberculosis M.bovis鉴定结果 PNB (+) TCH (+) PNB (－) TCH (+) PNB (－) TCH (－菌株数（株） 14 3 1
16S rRNA 基因 PCR 扩增电泳图。（M:DL 2000 Marker; H:标准株-7 的 PCR 产物）ification of different strains of 16SrRNA gene (M: Nucleic acid markeains H37Rv; 1-7: PCR products of strains)因的扩增及测序结果 NTM 的临床分离株的 hsp65 基因在经 PCR 扩增后，同大小约为 365bp 的 DNA 片段，见图 1.4，分别回收、测过与 GenBank 中的标准序列相比较，可鉴定出脓肿分枝
【参考文献】：
期刊论文
[1]AIDS合并非结核分枝杆菌肺病的诊治进展[J]. 黄葵,李勇. 传染病信息. 2017(02)
[2]非结核分枝杆菌肺病诊治研究进展[J]. 黄葵,李勇. 内科. 2017(02)
[3]免疫支持对非结核分枝杆菌肺病患者疗效影响[J]. 江万航,刘国标,杜正新,李方知. 广州医药. 2017(02)
[4]非结核分枝杆菌病实验室诊断技术及药敏试验研究进展[J]. 郭明日,张丽霞. 淮海医药. 2017(02)
[5]贵州省结核分枝杆菌临床分离株MIRU-VNTR位点基因分型研究[J]. 孙荣,毕雅坤,欧维正,王燕,秦万,蒙俊,陈峥宏. 中国病原生物学杂志. 2017(01)
[6]浅谈非结核分枝杆菌肺病的流行及诊断[J]. 刘汝建,王进. 中国继续医学教育. 2017(02)
[7]耐多药结核分枝杆菌基因位点表达研究[J]. 戚应杰,查晓丹. 实用医学杂志. 2016(24)
[8]艾滋病合并非结核分枝杆菌病研究进展[J]. 梁佩佩,卢洪洲. 临床内科杂志. 2016 (10)
[9]非结核分枝杆菌肺病的诊断与治疗研究进展[J]. 刘国威,白大鹏,梅早仙. 中国城乡企业卫生. 2016(06)
[10]非结核分枝杆菌病实验室诊断专家共识[J]. 中华结核和呼吸杂志. 2016 (06)
博士论文
[1]浙江地区非结核分枝杆菌在疑似肺结核患者中的流行研究[D]. 毕晟.浙江大学 2015
硕士论文
[1]RNA恒温扩增实时检测技术鉴定常见致病非结核分枝杆菌研究[D]. 李园园.苏州大学 2014
[2]非结核分枝杆菌的菌种鉴定、药敏试验和耐药机制的研究[D]. 聂文娟.北京市结核病胸部肿瘤研究所 2014
[3]应用16s rRNA基因序列分析鉴定非典型细菌的实验研究[D]. 沈亚娟.重庆医科大学 2012
本文编号：2903059
本文链接：https://www.wllwen.com/linchuangyixuelunwen/2903059.html
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