疾病标志物化学发光小动物成像研究

发布时间：2024-03-03 11:24

　　化学发光成像由于暗场测量的优势,使其公认为灵敏度最高的非侵入式成像技术之一,在基础医学、临床医学和药物研发等研究领域中显现出极高的学术研究价值和应用前景。当前以活体动物为对象的化学发光成像研究,全部集中在对体内活性氧的直接检测和与活性氧代谢调节相关的大分子检测,而直接针对蛋白、核酸等大分子,尤其是疾病标志物的检测尚无相关报道。一方面是医学和药学研究亟需高灵敏的活体研究方法;另一方面是化学发光成像受检测对象所限,无法满足以上需求。超越活性氧,实现对活体中蛋白标志物的靶向性成像检测,意义重大,也极具挑战性。本实验室在前期的化学发光成像研究工作中,研究制备了高效率的化学发光探针5,6-二甲酰肼荧光素。小动物实验表明,该探针能够对体内辣根过氧化物酶(HRP)富集区域实现成像定位和检测。据此,我们设计了一种成像检测蛋白标志物的新思路,即利用目标蛋白抗体实现对蛋白的靶向识别,通过成像检测抗体标记的HRP,进而实现对蛋白标志物的定位和水平检测。如能实现以上思路,有望为活体病理、药理以及疾病诊断提供一种全新的视角和创新技术平台。根据上述研究思路,本论文首先从蛋白标志物入手,实现对肿瘤标志物血管内皮生长...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－１：?５，６－二甲酰胼荧光素细胞毒性实验结果??

ＭＴＴ为染色剂，用酶标仪测定５７０?ｎｍ波长下各孔的吸光度值，以如下公??式：细胞活度（％）?＝?（Ａ＾－Ａｍ）?／?（Ａ＿－ＡＷ｜）?Ｘ１００，将吸光度值换算为细胞??活度，所得结果如图２－１所示：??１２０－．??１１１１１１１??０．０?０．５?１．０?１．５?２．０?２．....

图2-2VEf3F靶向化学发光成像结果

陕西师范大学硕士学位论文??由图中可以看出，细胞活度均大于８０％，且随着５，６－二甲酰肼荧光素浓度的增??大，细胞活度并没有明显的下降趋势，因此，可以认为，５，６－二甲酰胼荧光素对细??胞无毒性，可用于活体内生命过程的探究。??２．３．２兴趣蛋白的活体成像研究??⑴ＶＥＧＦ的靶向....

图2-3VEGF靶向成像信号与时间变化关系(取组内均值作图)

陕西师范大学硕士学位论文??由图中可以看出，细胞活度均大于８０％，且随着５，６－二甲酰肼荧光素浓度的增??大，细胞活度并没有明显的下降趋势，因此，可以认为，５，６－二甲酰胼荧光素对细??胞无毒性，可用于活体内生命过程的探究。??２．３．２兴趣蛋白的活体成像研究??⑴ＶＥＧＦ的靶向....

图２－４?ＡＦＰ靶向化学发光成像结果??２３??

第２章兴趣蛋白的活体成像研究??由图２－２的成像结果可知，在ＶＥＧＦ标准品注射之前，四肢的信号强度基本持??平；分别注射蛋白之后，仅有靶标区域即ＶＥＧＦ所在区域出现明显的发光信号，??而干扰蛋白ＡＦＰ标准品和ＢＳＡ所在区域发光信号强度与未注射时基本相同，即发??光信号是由于抗ＶＥ....

本文编号：3917714