土壤DNA提取技术在本科教学实验教学中的应用

发布时间：2021-02-24 21:41

　　开展科研训练、提高学生科学素养,一直是本科教学改革研究热点之一。以课题组常用的实验技术"土壤DNA提取"为基础,结合"大学生科技创新"等活动,设计综合创新实验,对可能参与课题组科研工作的学生进行选拔和培训。综合创新实验提高了学生的科研能力、训练了学生的科研思维,使学生顺利的参与到教师的科研工作中,实现了教学与科研的相互融合。 

【文章来源】：科教导刊(上旬刊). 2019,(06)

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【部分图文】：

不同方法提取总DNA的琼脂糖凝胶电泳图图

2019年/第16期/6月（上）125方法3：创新性配置腐殖酸吸附剂2ml（0.2mol/L纳米TiO2；0.1%活性炭）混合充分震荡1min；之后操作参考文献[6]并加以改进。最终用冷的70%乙醇洗涤沉淀2次，用TE缓冲液溶解沉淀，最终体积为50L。2.3DNA浓度和纯度的检测采用紫外分光光度法分别测定粗制DNA溶液的光密度值OD260，OD230，OD280，根据公式：[dsDNA]=50×OD260×稀释倍数，计算DNA的浓度（单位为g/mL），换算出每克干土提取DNA的量，根据OD230/OD260，OD260/OD280估算DNA的纯度。2.4PCR采用细菌16SrDNA基因的通用引物进行扩增，扩增后得到250bp左右的片段。3实验结果3.1土壤总DNA的提取和检测本研究所提取的土壤DNA经核酸蛋白测定仪检测，其浓度依次为每克土壤10.4~13.8g、15.6~20.7g、24.9~30.8g，其中方法3土壤DNA提取得率最高（表1）。DNA样品的纯度使用OD260/OD280和OD260/OD230两个指标检测，从表1可以看出，降低蛋白质污染的效果方法3（1.645~1.814）优于方法1（1.545~1.731）和方法2（1.548~1.666）；降低腐殖质污染的效果方法3（1.82~2.19）和方法1（1.71~2.50）相近，优于方法2（1.66~1.71）。表1土壤总DNA的提取量和纯度Ns∕shMs鐻sMsHMsHNs趘嘧iHihi枘H魔h魔?袛GP桮悥G悧G0擥皸G癹衛衚恗Pm餴0m@韢韢漓}犿}@題飣kmH鑜H3.2PCR扩增结果三种方法的琼脂糖凝胶电泳效果见图1。方法3所得的DNA浓度较高。对所得的DNA进行16SDNA扩增（图2），方法3所得的DNA条带清晰、明亮，说明扩增产物浓度较高，DNA模板获得有效扩增。综合以上结果，方法3?

【参考文献】：
期刊论文
[1]基于开放实验室的大学生科研训练项目实例[J]. 蒲贤洁,欧增福,韩忠,何光宏.  实验技术与管理. 2017(03)
[2]探究型实验的思路、模式与路径——基于浙江大学的探索与实践[J]. 陆国栋,李飞,赵津婷,刘向东.  高等工程教育研究. 2015(03)
[3]细胞生物学“半开放设计性实验”教学的意义与实施方法[J]. 薛雅蓉,刘常宏.  实验技术与管理. 2013(08)



本文编号：3049980