辣根素（AITC）对玉米象成虫酶的影响及与COX1结合位点预测

发布时间：2021-05-25 09:07

　　玉米象是重要的仓储害虫,为害范围广,程度重,是世界仓储头号害虫。现有多种化学熏蒸剂,因抗药性或毒性均存在使用的局限,辣根素（AITC）因其杀虫效果良好,残留量小,对环境和人体危害极小,被认为是具有广阔开发前景的植物源熏蒸剂物质。但目前关于AITC对玉米象的熏蒸机理尚不明确。本研究从玉米象成虫酶学、蛋白质组学、基因水平以及分子模拟对接探讨了AITC的杀虫熏蒸作用机制和可能的作用靶标,结果如下:1、AITC对玉米象体内过氧化氢酶、羧酸酯酶、线粒体呼吸链复合物II、细胞色素c氧化酶活力影响具有明显的剂量效应和时间效应。低剂量的辣根素可诱导过氧化氢酶、羧酸酯酶、线粒体呼吸链复合物II、细胞色素c氧化酶的增加,而高剂量的辣根素则对过氧化氢酶、线粒体呼吸链复合物II、细胞色素c氧化酶活力具有抑制作用;随着处理时间的增加,试虫体内的这两种酶活性逐渐下降。2、AITC处理玉米象成虫后,玉米象成虫的蛋白质含量发生了变化,与空白对照相比,1μl/L和2μl/L的AITC熏蒸处理玉米象成虫蛋白质含量有所增加;随着玉米象成虫死亡率的增加,玉米象成虫体内蛋白含量逐渐降低。采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化行... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 文献综述
    1.1 玉米象简介
        1.1.1 玉米象的发生与危害
        1.1.2 玉米象研究进展
        1.1.3 玉米象的防治现状
    1.2 辣根素简介
        1.2.1 辣根素简介及其产生背景
        1.2.2 辣根素对仓储害虫防治现状
    1.3 蛋白质组学和蛋白质的研究进展
        1.3.1 蛋白质的提取方法
        1.3.2 蛋白质的分离纯化方法
        1.3.3 蛋白质的质谱鉴定方法
        1.3.4 MALDI-TOF-MS简介
    1.4 四种酶的简介
        1.4.1 过氧化氢酶（CAT）
        1.4.2 羧酸酯酶（CarE）
        1.4.3 线粒体呼吸链复合物II（SQR）
        1.4.4 细胞色素c氧化酶
    1.5 同源建模及分子对接
        1.5.1 同源建模及分子对接研究背景
        1.5.2 同源建模
        1.5.3 分子对接
    1.6 研究的目的和内容
第2章 辣根素对玉米象成虫体内功能酶影响
    2.1 辣根素对玉米象成虫体内四种酶活力的影响
        2.1.1 试验材料及仪器
        2.1.2 试验方法
        2.1.3 试验结果
    2.2 AITC熏蒸处理玉米象成虫差异蛋白分析
        2.2.1 试验材料及仪器
        2.2.2 试验方法
        2.2.3 试验结果
第3章 玉米象细胞色素c氧化酶COX1基因克隆和序列分析
    3.1 玉米象总RNA的提取
        3.1.1 试验材料及仪器
        3.1.2 试验方法
        3.1.3 提取玉米象RNA试验结果
    3.2 玉米象COX1基因全长的扩增
        3.2.1 试验材料
        3.2.2 试验方法
        3.2.3 玉米象COX1基因 3'RACE及 5'RACE结果
    3.3 玉米象COX1基因开放阅读框的克隆
        3.3.1.试验材料
        3.3.2 全长验证的引物
        3.3.3 克隆开放阅读框的试验方法
        3.3.4 克隆开放阅读框的试验结果
    3.4 玉米象细胞色素c氧化酶COX1的序列分析
第4章 玉米象COX1的同源建模及与辣根素（AITC）的分子对接
    4.1 试验材料
    4.2 试验方法
        4.2.1 三维模型构建
        4.2.2 玉米象COX1的分子对接
    4.3 结果分析
        4.3.1 目的蛋白序列与模版蛋白序列的比对
        4.3.2 玉米象COX1的三维模型的构建
        4.3.3 模型评估
        4.3.4 玉米象COX1的分子对接结果
第5章 结论与讨论
    5.1 结论
        5.1.1 AITC对玉米象成虫体内四种酶活力的影响
        5.1.2 AITC熏蒸处理玉米象成虫差异蛋白的分析
        5.1.3 玉米象COX1全长基因的获得及分析
        5.1.4 玉米象COX1的同源建模及与辣根素（AITC）的分子对接
    5.2 讨论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]斑节对虾过氧化氢酶基因全长cDNA克隆及表达分析[J]. 傅明骏,赵超,杨其彬,周发林,江世贵,邱丽华.  南方水产科学. 2015(06)
[2]家鹅线粒体细胞色素b的同源建模与结构分析[J]. 陈艳荣,王继文.  长江大学学报(自科版). 2014(11)
[3]玉米象生物生态学及防治技术研究进展[J]. 郑旭,范锦胜,张李香.  中国农学通报. 2014(04)
[4]玉米种子仓储害虫玉米象的综合防治[J]. 梁英华,王登齐.  现代化农业. 2013(11)
[5]辣根素的生物活性研究进展[J]. 吴华,冯俊涛,何军,张兴.  中国生物防治学报. 2013(02)
[6]Autodock Vina与Discovery Studio在虚拟筛选耐药蛋白抑制剂中的比较[J]. 黄勇,陈晨,张志毅,童贻刚,赵勇.  生物信息学. 2012(04)
[7]基于Discovery Studio平台纤维素酶E4同源建模[J]. 李军,曹以诚,葛洪.  广东农业科学. 2012(09)
[8]玉米象和锯谷盗在小麦粉中的种群动态研究[J]. 吕建华,史雅,钟建军,王洁静.  粮食科技与经济. 2012(01)
[9]蛋白质分离纯化方法研究进展[J]. 吴少辉,刘光明.  中国药业. 2012(01)
[10]辣根的化学成分及其生物活性研究进展[J]. 陈虹霞,王成章.  生物质化学工程. 2008(01)

博士论文
[1]食用辛辣风味物质异硫氰酸烯丙酯（AITC）的研究[D]. 肖华志.中国农业大学 2004

硕士论文
[1]玉米象（Sitophilus zeamais Motschulsky）试验种群生物学特性及生态学特征的研究[D]. 高远.云南农业大学 2014
[2]克雷伯杆菌中FNR蛋白三级结构模建及二聚作用研究[D]. 李霞.青岛科技大学 2012



本文编号：3205079